姜智星 杨 森 陈 琛 梁敏锐 邹和建

(复旦大学附属华山医院风湿科,上海 200000)

系统性硬化症(Systemic sclerosis，SSc)是一种以皮肤、肺等多器官发生炎症、血管病变、纤维化为特征的慢性自身免疫性疾病。内皮细胞功能失调与SSc早期血管病变有关，在血管重塑中起到重要作用[1]。其中，自身免疫诱导内皮细胞产生的细胞因子及黏附因子最终导致内皮细胞的损伤及凋亡[2]。血管病变主要包括肺动脉高压、雷诺现象、指端溃疡，严重影响患者预后及生活治疗，目前研究发现内皮素-1、Fli-1(Friend leukemia virus integration 1,Fli-1)、血管紧张素Ⅱ1型受体(Angiotensin Ⅱ type 1 receptor，AT1R)、内皮素受体A(Endothelin-1 type A receptor，ETAR)等血管舒缩因子可通过作用于SSc患者血管内皮细胞发挥其生物学功能，参与SSc血管病变进程[3-5]。

CXCL4[Chemokine(C-X-C motif)ligand 4，CXCL4]是由70个氨基酸组成的，分子量为7.8 kD的趋化因子。其特异性受体为CXCR3，可通过干扰血管生成因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)和成纤维生成因子(Fibroblast growth factors,FGF)的生成发挥抗血管生成等作用。CXCL4可以与这些促血管生成因子结合，从而阻断其特异性受体6,7，或通过与FGF或VEGF竞争细胞表面硫酸乙酰肝素蛋白多糖[7,8]，拮抗血管生成。既往研究发现，CXCL4在SSc患者体内血清学水平较健康人群明显升高，且在SSc伴肺动脉高压患者中CXCL4升高尤为明显[9]。然而具体调控机制尚不明确。

因HDMEC广泛用于研究SSc血管病变机制研究中，故本研究旨在探讨CXCL4对HDMEC的增殖和血管形成功能，及其分泌内皮素-1、Fli-1、AT1R、ETAR的影响。

1 材料与方法

1.1实验材料、试剂 原代HDMEC购自中国科学院细胞库；内皮细胞完全生长培养液购自Promocell公司；胎牛血清购自Gibco公司；CXCL4购自PeproTech 公司，anti-CXCL4 antibody购自R&D公司；CCK-8细胞计数试剂盒购自日本同仁化学所；……