BDNF基因重组慢病毒转染MSCs诱导分化神经样细胞的实验研究
2018-05-21卫辉任瑞芳赵君贵永堃闫海清王昊亮闫志新张平
卫辉 任瑞芳 赵君 贵永堃 闫海清 王昊亮 闫志新 张平
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)被誉为一种多潜能的种子细胞,具有多向分化及很强的自我增值能力。其低免疫源性为细胞的自体与异体移植提供了极大方便[1-7]。在不同药物、细胞营养因子、细胞共培养等作用下可诱导MSCs分化为多种不同细胞,甚至向神经细胞跨胚层分化[3,5,8-10],研究表明正常神经细胞间的突触联系以及靠突触联系所传递的电生理及神经递质在该神经样细胞上很可能也具备[11-14],而且移植后可代替坏死的神经细胞发挥正常的生理作用,明显修复损毁的组织结构,进一步促进神经功能恢复。突破了脑细胞损伤后不能恢复的常规观念,成为现阶段神经系统疾病治疗的一个焦点[15-20]。
脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)是神经营养因子家族成员之一,1982年由德国神经化学家Barde等[21]首次从猪脑提取液中发现并提纯,其广泛分布于中枢神经系统内,在神经系统发育过程中能延缓神经元的变性和凋亡,对神经元的存活、分化及生长发育起重要作用,还能降低缺血性脑损伤后局部组织的缺血程度,防止神经元受损,改善病理状态,促进和保护神经元的修复和再生,从而增进脑卒中后神经功能的恢复,是中枢及周围神经系统神经元维持生存及正常生理功能所必需的神经营养因子[22-26]。有研究发现BDNF不仅能诱导MSCs分化为神经样细胞,而且能延长其存活时间[10,27]。
本实验旨在通过应用BDNF基因重组慢病毒(1entiviral vectors,LV)转染MSCs,诱导其向神经样细胞分化,并将其移植到脑出血模型体内后应用免疫荧光技术检测诱导后的MSCs脑内迁移及分化神经细胞标志物的情况。……
