马国珍 ，舒 劲 ，王 煜 ，宋瑞平 ，张晓明 ，卢雨蓓 ，田 苗

1甘肃省中医院，甘肃 兰州 730050；2中国中医科学院

功能性消化不良(Functional Dyspepsia，FD)病程迁延难愈，易反复，临床疗效不理想，对患者的生活工作带来极大的痛苦，已然成为全球不断研究的疾病之一。在一项全球性的调查中［1］，以上腹痛为主的FD患者占8%～50%左右，而以上消化症状为主的约占20%～50%。另一项系统研究表明［2-3］，功能性消化不良的总患病率在12%～15%左右；而亚洲FD患病率则在10%～23%之间，较之亚洲发达国家，我国功能性消化不良的患病率整体偏高。有学者研究发现［4］，FD患者在情感职能、精神健康等6个维度中的分数明显降低，提示FD患者的心理及生理均受到不同程度的影响。由于现代医学对FD发病机制的阐释仍不明确，故目前仍以对症支持治疗为主，包括抑酸护胃，促胃动力，助消化及抗幽门螺杆菌等。多潘立酮是促胃动力的常用药物，但由于该药经肝脏、肾脏代谢，严重肝肾功能不全者不宜长期使用［5］，且会加重患有心脏疾病患者的心律失常，因此临床应用受到限制。治疗FD的大部分西药存在停药后病情反复的现象。随着中医药对FD研究的深入，祖国医学对防治FD所体现出的独特优势，受到越来越多的重视。运脾颗粒为甘肃省中医院院内制剂，笔者从胃肠激素的角度探讨运脾颗粒的作用机理。

1 材料与方法

1.1 动物 健康SPF级SD雄性大鼠70只，日龄40天左右，平均体质量(180±20)g，均由甘肃中医药大学动物实验中心提供，实验动物质量合格证号：NO.62001000000299。

1.2 实验药品 运脾颗粒，主要由党参、白术、茯苓等药物组成(甘肃省中医院制剂中心生产，规格6 g/袋，甘药制字Z09001927)；多潘立酮片(西安杨森制药有限公司，规格10 mg/片，国药准字：0H9100103)；0.9%生理盐水(四川科伦药业股份有限公司生产，国药准字：H51021157)。

1.3 试剂 胃动素(MTL)、胃泌素(GAS)、胆囊收缩素(CCK)Elisa试剂盒均由上海生工生物工程股份有限公司提供。

1.4 主要仪器 RT-6100酶联免疫检测仪(雷杜生命科学股份有限公司)，GS-671电子秤(大连海星生物有限公司)。

1.5 实验方法

1.5.1 动物分组 SD雄性大鼠适应性喂养1周后，按随机数字表法随机分为正常对照组(空白组)15只，造模组55只，造模结束后2组各随机抽取5只，以验证造模是否成功。将造模成功的50只大鼠随机分为模型组，运脾颗粒低、中、高剂量组及西药对照组，每组10只。

1.5.2 造模方法 肝郁脾虚型FD大鼠模型的建立：采用适度夹尾刺激［6］+ 不规则喂养［7］+ 苦寒泻下［8］的复合因素造模法制成FD大鼠模型。除正常对照组外，其余各组按“夹尾刺激法+不规则喂养”造模14天，结合“苦寒泻下”造模7天：用长海绵钳夹大鼠尾巴末端近1/3处，以令其尖叫挣扎但不破皮为度，使其发怒并和其他大鼠厮打(若有抓伤，予以碘伏消毒伤口，预防感染)，每次每组刺激30分钟，2次/天，连续造模14天；将大鼠正常饮水，单日喂食，双日禁食(记录每次喂给的食量，记录于造模前、造模后、治疗后大鼠的体质量)，并于禁食日予以番泻叶水煎剂灌胃，2次/天。14天后，造模结束。

1.5.3 药物制备及给药 药品均按照人与大鼠的等效剂量换算(参照人与动物之间按体表面积折算的等效剂量比值表)，换算系数为0.018。换算后运脾颗粒高、中、低剂量组将分别配置成0.216g/mL、0.108g/mL、0.054g/mL并均以 1mL/100g灌胃；西药组将多潘立酮片研碎成粉末制成0.27 mg/mL的混悬液以1 mL/100g灌胃；空白组与模型组的大鼠每日用生理盐水以1 mL/100 g灌胃，6组均每日2次，给药14天。番泻叶水煎剂［8］：以100 mL水含5 g番泻叶的比例，将番泻叶置于沸tents of CCK decreased,and the difference had statistical meaning(P＜0.05,P＜0.01);and the difference was statistically significant in the comparisons of the contents of MTL,GAS and CCK when moderate and high dose groups of spleen-activating granules were compared with western medicine group(P＜0.05),and the difference had no statistical meaning when low dose group was compared with western medicine group(P＞0.05).Conclusion:Spleen-activating granules could increase food intake and body weight of the rats of FD of liver-depression spleen-deficiency pattern,improve mental state,feces,coat colour of the models,which might be related to that it could up regulate the content of MTL and GAS of the model and down regulate the level of CCK in the serum,and it′s one of the mechanisms of spleen-activating granules in the prevention and treatment for FD.

Key words spleen-activating granules;functional dyspepsia;liver-depression spleen-deficiency;gastrointestinal hormone水中浸泡，按0.02 mL/g灌胃。

1.5.4 标本采集与处理 各组大鼠末次给药后，禁食不禁水24h，次日上午注入5%碳末悬液0.01mL/g灌胃给药。30 min后，用10%水合氯醛腹腔注射，以0.3 mL/100g麻醉。打开腹腔，腹主动脉采血，室温静置1～2 h后，3 000 r/min离心10 min，提取血清，分装于离心管中，并逐一记录，存放于-80℃冰箱中。ELISA法检测大鼠血清中MTL、GAS及CCK的含量变化。

1.6 统计学方法 运用SPSS 21.0进行统计分析，计量资料以(±s)表示，先对资料进行正态性检验。符合正态分布的计量资料，多组间比较采用单因素方差分析(One-Way ANOVA)，方差齐者用LSD法，不齐者用Dunnett′sT3法。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组大鼠一般情况观察 造模前，可见各组大鼠精神状态良好，皮毛光泽，皮肤黏膜呈粉红色，活动灵敏，粪便呈梭形，干稀适中。造模初期，造模组大鼠在夹尾刺激时反应强烈，怒叫，易激惹，造模过程中有排便现象。解除夹尾刺激后，大鼠出现相互撕咬或厮打现象，精神状态极为不安。而在造模后期，造模各组大鼠出现对夹尾剌激的反应减弱，有撕咬、尖叫但程度有所减轻，解除夹尾刺激后，大鼠呈高警觉对峙状态；并逐渐出现精神萎靡，眯眼，活动减少，喜扎堆缩于角落，食量减少，毛发粗乱枯槁无华，足蹼、鼻尖、耳缘黏膜苍白，粪便时干时稀，拉尾排便反应阳性。干预结束后，空白组大鼠精神状态佳，毛色鲜亮，活跃灵敏，进食、体质量较之前均有所增加。各治疗组大鼠均不同程度出现情绪平缓，毛发光泽有所改善，进食量增多，活动度增加，粪便逐渐成形，干稀适中。

2.2 各组大鼠进食量、体质量变化 造模前各组大鼠食量、体质量无差异，差异无统计学意义(P＞0.05)；造模后与空白组比较，模型组、运脾颗粒各剂量组及西药组大鼠进食量、体质量均有不同程度的减少，且差异具有统计学意义(P＜0.05)；干预后与模型组比较，运脾颗粒各剂量组及西药组大鼠进食量、体质量均有增加，且差异有统计学意义(P＜0.05)；而运脾颗粒各剂量组与西药组相比，进食量与体质量差异无统计学意义(P＞0.05)。见表1-2。

2.3 各组大鼠血清MTL的含量变化 与空白组比较，模型组大鼠血清MTL、GAS浓度有所下降，血清CCK浓度升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；与模型组比较，运脾颗粒各剂量组及西药组大鼠血清MTL、GAS浓度均升高，血清CCK浓度降低，且差异均有统计学意义(P＜0.05)；且运脾颗粒中、高剂量组大鼠血清MTL、GAS、CCK浓度变化与西药组比较，差异有统计学意义(P＜0.05)，而运脾颗粒低剂量组大鼠血清MTL、GAS、CCK浓度变化与西药组比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。见表3。

表1 各组大鼠食量变化比较(±s)

表1 各组大鼠食量变化比较(±s)

注：△表示与空白组比较，P＜0.01；★表示与模型组比较，P＜0.01；※表示与西药组比较，P＞0.05

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表2 各组大鼠体质量变化比较(±s)

表2 各组大鼠体质量变化比较(±s)

注：△表示与空白组比较，P＜0.01；★表示与模型组比较，P＜0.01；※表示与西药组比较，P＞0.05

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表3 各组大鼠血清MTL的含量变化比较(±s)

表3 各组大鼠血清MTL的含量变化比较(±s)

注：△表示与空白组比较，P＜0.01；与模型组比较，P＜0.05，☆表示P＜0.01；与西药组比较，※表示P＞0.05，▲表示P＜0.05

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3 讨论

功能性消化不良不仅受神经系统的调节，体液调节也发挥着至关重要的作用，其中包括胃肠激素的分泌调节。胃肠激素作为胃肠道与脑进行信号传递的重要化学物质，这些信号可在脑干迷走复合体发挥功用，从而影响迷走神经信号的传出，最终参与胃肠运动、摄食以及食欲的调控［9］。有学者［10］运用RT-PCR或免疫组化的方法，发现FD患者胃黏膜中嗜铬细胞数目增多，同时伴有5-羟色胺含量升高，因此认为胃的高敏感性、消化道动力异常可能与此相关。现已发现的胃肠激素约40多种，被广泛研究的有胆囊收缩素、胃动素、血管活性肠肽、胃泌素和生长抑素等，对胃肠道动力有重要调节作用。相关研究显示［11］，不同的胃肠激素对胃肠动力有不同的作用，因此深入探究FD及消化道运动与胃肠激素的相关性，以期从FD可能发生的病因病机出发，为FD的诊治提供新的思路。

MTL主要生理作用是对消化间期移行复合运动(MMC)Ⅲ相收缩运动［12］有重要调控，加速胃肠蠕动，促进胃排空，并能参与食欲与情志。Sanger等人发现［13］，FD 患者存在胃排空延缓，MMCⅢ期收缩能力减弱是由于MTL分泌水平的下降所致，且FD患者血浆MTL含量较正常人明显减少。Cuomo等人通过实验证实［14］，MTL可加强人体胃体近端收缩，进而缓解进餐后引起的饱胀不适等。大量的研究证实，给予中药或西药干预后，MTL水平上调，如王忠亮［15］运用复方嗜酸乳杆菌片联合莫沙必利干预FD患者，以观察胃排空及MTL含量的变化。结果显示，干预8周后，患者血清MTL含量较治疗前明显上升，且胃排空总有效率优于治疗前。

GAS生理功能主要是分泌胃酸、胃蛋白酶，以助消化，且使胃窦及幽门括约肌收缩；同时GAS具有营养作用，可通过增加黏膜血流，保证胃肠黏膜生长［16］。Breukink 等［17］研究发现 GAS 含量的波动在一定程度上影响着胃肠平滑肌的运动情况。也有学者［18］观察FD患者精神状态与胃窦黏膜GAS表达的相关性，通过焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)来评估30例FD患者的精神状况，结果发现GAS的表达与SAS、SDS评分呈负相关，所以FD患者常伴焦虑抑郁可能与GAS表达水平下降有关。

CCK又名缩胆囊素，是一种由33个氨基酸构成的多肽，由小肠黏膜的I细胞分泌，主要生理功能是促进胆囊收缩，延缓胃排空，刺激胰腺及胃酸分泌，增加结肠动力，是机体饱胀感的调节激素之一。大量研究发现［19-20］，胃排空的延缓而引起的胃肠道不适反应与CCK高水平的表达有关，且高表达的CCK持续刺激肠道收缩，使结肠黏膜机械感受器的敏感性增强，是导致腹痛的机制之一。在CCK-1拮抗剂干预后FD患者的饱胀不适、恶心等临床症状得到减轻，也从侧面证实CCK能够抑制胃排空，另有研究指出CCK作为影响FD患者餐后饱胀不适综合征的重要胃肠激素［21］。

运脾颗粒由全国名中医王自立教授的运脾汤变化而来，王自立教授在总结前人经验的基础上，结合自己多年的临床体会，认为脾虚失运，气机升降失常是病机关键所在。针对脾虚失运证，提出“脾以运为健，以运为补”理论，临证确立“健脾先运脾，运脾必调气”之治法，立运脾汤一方补运同举，补中寓运，运中有补，补不碍滞，运不伤正，已成为诊治脾胃病的基本思路与治则。其基本药物组成：党参、白术、茯苓、仙鹤草、枳壳、佛手、石菖蒲、炒麦芽等。方中党参益气健脾；白术补脾益胃，燥湿和中；仙鹤草补脾肾之虚，亦有强壮之效；茯苓健脾渗湿。4药合而为君，有四君子汤之义。佛手疏肝理气和胃，以防木郁克土，却无耗气伤津之弊；枳壳善理气宽中，行气消胀，与佛手合用增强运脾调气之效；炒麦芽健脾消食、行气消胀；石菖蒲芳香醒脾，化湿和胃。诸药合用，寓补气以助运，调气以健运，兼以肝脾共调，使脾运复健，升降如常，诸病自除［22-23］。

现代药理也证实［24-29］：党参、白术、枳壳、佛手可促进小鼠胃排空，加强肠蠕动，提高消化能力，增加体质量；炒麦芽促进胃酸、胃蛋白酶分泌，有助消化的作用；石菖蒲也可促进大鼠胆汁分泌；仙鹤草具有抗炎、抗疲劳作用；茯苓可调节肠道菌群；此外，佛手、石菖蒲对焦虑、抑郁等精神情绪障碍有良好的改善作用。

本实验结果显示：运脾颗粒通过对肝郁脾虚型FD大鼠胃肠激素多靶点、多层次的调控，使得FD大鼠的进食量及体质量增加，运脾颗粒通过调节胃肠激素，促进了胃排空及肠推进功能，使得FD胃肠动力得到改善，最终达到治疗FD的目的。

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