周志扬 廖艳红 刘洪亮 刘合干 刘实超 李丽娟 刘建成 汪胜

[摘要]为提高白及种子育苗效率，通过组培后炼苗、催芽后直播和经特殊处理后直接撒播育苗方式，观察发芽率、成苗率、统计劳动耗时，确定合理经济的白及种子处理方式和育苗方法。结果显示，组培方式育苗综合成苗率不足60%，劳动耗时多；直播育苗综合成苗率均达到70%以上。白及种子特殊处理后大棚撒播具备劳动耗时少，成苗率高，可产业化推广。

[关键词]白及；种子育苗；培养基；大棚撒播

[中图分类号]R282.71 [文献标识码]A

白及为兰科植白及Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.的干燥块茎。是一种常用中药，具有收敛止血，消肿生肌功效，临床上用于咯血，吐血，外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂。白及分布于我国各地，由于白及市场价格一直处于高位，造成过度采挖，野生资源面临枯竭。白及通常使用分割球茎繁殖的方式，由于白及每年球茎增值2～3个，严重阻碍白及的规模化种植。每个白及果荚内含有1万多颗种子，自然萌发十分困难，云南植物研究所采用白及种子无菌育苗技术，收到令人满意的效果，极大的提高了白及育苗水平。本公司在使用培养基催芽基无菌育苗基础上逐步过渡到开放式非无菌条件下育苗，将白及育苗从组培室移至大棚，极大的降低了育苗成本。

1 仪器、试剂与材料

1.1 仪器

高压灭菌柜（上海博讯），恒温摇床（上海博讯），加湿机（东莞九江），生物安全柜（上海博讯）。

1.2 试剂

KNO3，NH4NO3，MgSO4·7H20，KH2PO4，CaCl2，MnSO4·4H2O，ZnSO4·7H2O，CuSO4·5H2O，H3BO3，NaMoO4·2H2O，KI，CoCl2·6H2O，FeSO4·7H2O，Na·EDTA，甘氨酸，鹽酸硫胺素（VB1），盐酸吡哆醇（VB6）烟酸，肌醇、蔗糖等均为分析纯；EM菌（湖南农科院提供）。

1.3 三叉紫花白及果荚（湖南农业大学生物技术学院提供）

2 方法与结果

2.1 培养基准备

液体发芽培养基1/2MS+1.0 mg /L 6-BA +0.5 mg /L NAA+30g蔗糖，固体发芽培养基1/2MS+1.0 mg /L 6-BA +0.5 mg /L NAA+30g蔗糖+7g琼脂/L，液体壮苗培养基为MS+1.0 mg /L 6-BA+0.1 mg /L NAA+30g蔗糖，固体壮苗培养基为MS+1.0 mg /L 6-BA+0.1 mg /L NAA+30g蔗糖+7g/L琼脂，固体生根培养基为1/2MS+1.0 mg /L NAA+80g/L香蕉泥+30g蔗糖+7g/L琼脂，以上培养基经121℃20分钟灭菌，在生物安全柜100级净化层流条件下分装至培养瓶中。大棚内土壤，农家肥鸡粪经堆积发酵120天，按30%掺入过10目筛的河道沉积细泥沙中，拌匀，铺经平整好的泥土上，厚度为3cm。

2.2 果荚处理

取未开裂完整白及果荚50枚，随机分成5份，每份10枚，其中4份表面经75%乙醇擦拭，置紫外照射30min；另1份不做表面消毒处理；

2.3 按以下5种方案实施培养育苗

2.3.1 方案1。取10枚白及果荚在生物安全柜内取出种子转移至液体培养基中，组培室培养，恒温摇床120转/分钟，10天，25℃，相对湿度75%，培养30天；生物安全柜下转移至固体壮苗培养基中，25℃，相对湿度75%培养30天；生物安全柜下转入固体生根培养基中，25℃，相对湿度75%培养30天；取出白及种苗洗去培养基质，转移至大棚内置含有30%有机肥沉泥细沙表面，15℃～30℃炼苗120天，每天喷雾洒水2次，维持相对湿度在65%～75% 。

2.3.2 方案2。取10枚白及果荚在生物安全柜内取出种子转移至液体培养基中，组培室培养，恒温摇床120转/分钟，10天，25℃，相对湿度75%，培养30天；生物安全柜下转移至液体壮苗培养基中，25℃，相对湿度75%培养30天；生物安全柜下转入固体生根培养基中，25℃，相对湿度75%培养30天；取出白及种苗洗去培养基质，转移至大棚内置含有30%有机肥沉泥细沙表面，15℃～30℃炼苗120天，每天喷雾洒水2次，维持相对湿度在65%～75%。

2.3.3 方案3。取10枚白及果荚在生物安全柜内取出种子转移至固体培养基中，组培室培养，恒温摇床120转/分钟，10天，温度25℃，相对湿度75%，培养30天；生物安全柜下转移至固体壮苗培养基中，温度25℃，相对湿度75%，培养30天；生物安全柜下转入生根培养基中，温度25℃，相对湿度75%，培养30天；取出白及种苗洗去培养基质，转移至大棚内置含有30%有机肥沉泥细沙表面，15℃～30℃炼苗120天，每天喷雾洒水2次，维持相对湿度在65%～75%。

2.3.4 方案4。取10枚白及果荚在生物安全柜内取出种子转移至液体培养基中，组培室培养，恒温摇床120转/分钟，10天，温度25℃，相对湿度75%，培养30天；滤取白及小球茎纯化水清洗干净，用0.5%EM菌液浸泡6小时，将浸泡后的白及小球茎撒播在大棚内置含有30%有机肥沉泥细沙表面，自然生长180天，每天喷雾洒水2次，维持相对湿度在65%～75%。

2.3.5 方案5。取10枚白及果荚，取出细小种子过3号筛，0.5%EM菌液浸泡72小时，直接撒播在大棚内置含有30%有机肥沉泥细沙表面，自然生长210天，每天喷雾洒水2次，维持相对湿度在65%～75% 。

2.4 结果

2.4.1 白及种子不同处理方式发芽30天后观察发芽水平，按发芽与未发芽计数结果见表1。

2.4.2 白及种子不同处理方式育苗210天观察成苗情况见表2。

2.4.3 白及种子不同处理方式对劳动耗时的统计见表3。

3 讨论

从表1看出，白及种子发芽使用无菌培养基培养，效果明

显高于溶胀后直接撒播。白及种子细小，质轻浮于液面，在振摇条件下利于种子与营养液的充分接触溶胀，因此发芽率较高基本处于接近90%的水平。

从表2看出，炼苗后成苗率以直接撒播明显高于经组培培养的白及球茎，经过发芽、壮苗、生根培养基处理的白及种苗炼苗过程中损耗率均在20%以上，白及在组培室育苗，环境温度差在±3℃内，相对湿度偏差在±5%以内，转入大棚炼苗，大棚内昼夜温差波动超过10℃，相对湿度偏差为±10%，白及球茎根系经过洗涤需要重新适应土壤，造成炼苗过程的适应性淘汰损耗。

白及种子通过组培方式育苗，需要的条件较高，育苗经过发芽、壮苗、生根、炼苗过程，相对繁琐，耗时费工，从表3 可看出。发芽培养基中白及种子密度大，10天左右需要分瓶培养，固体培养基中白及幼苗盘结，分离过程中容易伤根造成损耗，费时费力。按每小时20元计算工价，组培苗210天内工时成本为0.28元/株，加上能耗、喷水日常护理，白及组培苗的成本与市场白及一年生组培苗0.4元/株市场售价接近。白及种子经过简单处理后撒播省去大量的人力成本，其生产成本不足0.05元/株，尽管发芽率略低于组培苗，但其综合成苗率可达70%以上。

如何提高白及种子直播后发芽率，白及种子育苗和季节的关联性，白及炼苗后的管理方式，如何提高白及种植产量需要进一步试验证明。

[参考文献]

[1] 国家药典委员会.中国药典[M].北京：中国医药学出版社，2015：103.

[2] 和寿星，徐中志，等.白及无菌播种育苗技术[J].云南农业科技，2010（6）：38-39.