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快速去除冰冻红细胞甘油的方法改进研究

2018-04-16赵京文

现代检验医学杂志 2018年2期
关键词:方法

冯 娜,兰 静,彭 鹏,王 锦,刘 娜,张 嫄,赵京文

(陕西省血液中心/西安市中心血站,西安 710061)

冰冻红细胞,是指将悬浮红细胞保存于40%的甘油中用以延长红细胞保存时间,通常在-80℃下可保存10年。在血液供应紧张及稀有血型的血液应用时,可以将冰冻红细胞去除甘油,进而替代悬浮红细胞用于患者,用来缓解临床用血压力。在实际应用中,冰冻红细胞解冰冻去甘油耗费时间较长,同时如何能快速去除甘油并且不损伤红细胞是关键问题。近年来,众多学者将细胞膜运输的数学模型与冰冻红细胞去甘油相结合,使得去甘油的时间极大的缩短[1],并通过优化的实验流程以避免渗透损失。Lusianti等[2]经过微积分计算,确定冰冻红细胞分别与20.4 g/dl盐水孵育8 s,3 g/dl盐水孵育22 s后,可去除冰冻红细胞中绝大部分的甘油[1,3]。

为缩短去除甘油的时间,同时保持红细胞的稳定。我们选择使用三种不同浓度的盐溶液(20.4,3及0.9 g/dl)分别洗涤冰冻红细胞,并优化试验步骤,结果报告如下。

1 材料和方法

1.1研究对象随机选取100人份的悬浮红细胞制备成冰冻红细胞,然后从每人份取10 ml的冰冻红细胞作为检测样本,将制备好的冰冻红细胞分装为1 ml/管,冻存于-80℃保存[4]待检测。

1.2试剂和仪器SysmexKX-21三分类血细胞计数仪(上海希森美康仪器设备有限公司),血浆游离血红蛋白检测试剂盒(北京瑞尔达生物科技有限公司),三酰甘油检测试剂盒(浙江东瓯诊断产品有限公司),大容量细胞计数池。

1.3方法

1.3.1将冰冻红细胞置于37℃水浴中融化1 min。……

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