MALDI-TOF MS在短期培养后胸腹腔积液中细菌快速鉴定的应用
2018-04-16芦嘉
芦 嘉
(常州市第一人民医院检验科,江苏常州 213003)
近年来,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)作为一项准确、快速、经济的鉴定技术在临床微生物检测中发挥着越来越重要的作用,目前的研究热点是临床样本中病原菌的直接检测,但MALDI-TOF MS的鉴定对象必须是细菌的单个菌落[1],于是如何从样本中获得足量的细菌纯培养就是MALDI-TOF MS普及过程中必须解决的问题。而胸腹腔积液的致病菌检测一直是临床的一项巨大需求,由于胸腹腔积液成分复杂,常规的细菌检测加上药敏试验一般最快也需要2天以上的时间[2],临床对于缩短检测时间的呼声从未减少过。本研究对常见胸腹腔积液进行短期培养,增菌、离心、洗涤、富集细菌后用MALDI-TOF MS检测,旨在建立胸腹腔积液细菌的快速检测方法并应用于临床。
1 材料和方法
1.1研究对象选取常州市第一人民医院2017年4~10月各科室送检的总计360例确诊为细菌感染患者的胸腹腔积液,其中胸腔积液163例、腹腔积液197例。所有样本均按照《全国临床检验操作规程》留取、运送及保存。
1.2仪器及试剂PHOENIX微生物鉴定仪及配套试剂购自美国BD公司;MALDI-TOF MS检测仪及配套的96孔不锈钢靶板、IVD细菌测试标准品均购自德国Bruker公司;α-氰基-4-羟基肉桂酸(HCCA)购自美国Sigma公司;哥伦比亚血琼脂平板购自上海科玛嘉微生物技术有限公司;营养肉汤琼脂培养液购自杭州滨和微生物试剂有限公司。质控菌株包括大肠埃希菌(ATCC 25922)、金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853),均购自美国Thermo Fisher公司。
1.3方法每份样本分为三份,一份常规培养并使用微生物鉴定仪检测;……
