王述文，姚红霞，饶　若

(海南省人民医院血液病研究室，海口　570311)

CD34是目前公认的最主要的造血干/祖细胞表面标志物。CD133是继CD34之后新发现的比CD34更有价值的干细胞表面抗原标志[1]。CD133目前被发现的同源性抗原有两种，即CD133-1和CD133-2。研究表明在正常骨髓或外周血CD133-1，CD133-2表达一致，但是在急性白血病(AL)中CD133-2的表达水平明显高于CD133-1，存在统计学差异[2]。国内对于CD133-1的研究较多，但是对于CD133-2的研究较少，尤其是其在AL病程的不同时期有何变化尚未见报道。本研究应用直接荧光标记流式细胞术检测42例初治AL患者、15例完全缓解期(CR)患者及10例复发患者CD133-2的表达，以探讨其在AL不同病程中的表达及其临床意义。

1　材料和方法

1.1研究对象AL患者共67例，其中初治组42例，CR组15例，复发组10例；男性33例，女性34例，年龄18～83岁。对照组15例，为血小板减少、骨髓无明显异常的患者。全部病例的诊断标准均根据张之南主编《血液病诊断与疗效标准》[3]，其中CR期及复发期诊断标准参考国内疗效标准(形态学标准)。

1.2试剂和仪器鼠抗人CD133-2(293C3，IgG2b)及其同型对照均购自Miltenyi公司，检测仪器为BD AriaII流式细胞仪。

1.3方法采集患者经EDTA抗凝的骨髓1～2 ml，调整细胞浓度为1×106/ml。骨髓标记抗体后室温下避光反应15 min，溶血后用FCM检测。上机前均使用质控荧光微球校准仪器，用CD45/SSC设门，根据CD45表达程度和SSC颗粒度大小将细胞分为粒细胞群、单核细胞群、淋巴细胞群、红细胞和碎片群及原始幼稚细胞群，通过二维表型图谱，分析CD133-2抗原表达情况。根据AL免疫学特征欧洲协作组标准，≥20%细胞表达为阳性，<20%为阴性。

2　结果……

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