体外循环期间Th1、Tc1/Th2Tc2细胞亚群与机体致炎/抗炎反应的关系
2018-04-09倪海峰肖颖彬
倪海峰,肖颖彬
免疫功能失调是导致体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)创伤及术后并发症的原因之一,对其致病机制、临床救治的研究是心外科领域的重要课题。T细胞是机体重要的免疫调节效应细胞,CPB对Th1、Tc1/Th2、Tc2细胞功能亚群分化状态的影响目前研究尚少。笔者对临床CPB病例T细胞Th1、Tc1/Th2、Tc2细胞功能亚群变化及与机体致炎/抗炎反应变化关系进行观察,报告如下。
1 资料与方法
1.1研究对象 2015年3月—2016年12月,选取二尖瓣瓣膜病患者20例作为试验组,年龄31~55岁,男10例,女10例;动脉导管未闭患者20例作为对照组,年龄20~39岁,男10例,女10例。纳入标准:(1)年龄>18 岁;(2)诊断明确,欲行 CPB 下二尖瓣置换术或非CPB下动脉导管结扎术;(3)患者知情同意接受该研究。排除标准:(1)有高血压、冠心病、糖尿病病史,或患有梅毒、乙型肝炎、丙型肝炎者;(2)有活动性感染、风湿活动期、肝肾疾病、慢性阻塞性肺部疾病者;(3)非首次心脏手术患者;(4)术前左心室射血分数<40%;24 h内发生心绞痛、心肌酶谱升高者;1个月内发生心肌梗死患者;(5)术前1周内服用过影响免疫功能的药物者。
试验组于CPB下行二尖瓣置换术,转流时间62~91 min;对照组于非CPB下行动脉导管结扎术,手术时间65~98 min。于术前、CPB或手术开始20 min、停机前或手术结束时、术后4 h、术后24 h、术后72 h抽取静脉血。该研究经医院伦理委员会批准,受试对象及亲属签署知情同意书,研究过程符合伦理学原则。
1.2 方法 浓度梯度法分离单个核细胞,尼龙柱滤除B细胞,获取T细胞。提取T细胞RNA,-70℃保存。RNA印迹法检测T细胞IFN-γ/IL-4mRNA表达。细胞内因子染色、免疫荧光标记检测T细胞IFN-γ、IL-4蛋白表达。……
