赵志文 李艳娇 户勋 范晓静 卓涛 邹华松

（福建省高校植物-微生物互作重点实验室 福建农林大学植物保护学院，福州 350002）

植物病原细菌不能直接从寄主表面进入植物细胞，一般从自然孔口和伤口侵入寄主植物，在细胞间隙或维管束中繁殖［1］。不同细菌入侵的途径不同，在引起病害症状过程中，具有各自的侵染特点［2-5］。借助分子标记方法，可以示踪病原细菌在寄主中的入侵、定殖和繁殖。标记病原微生物的方法主要有抗生素抗性基因、lacZ基因、lux基因、inaZ基因、xylE基因、gus基因以及来源于海洋生物水母的绿色荧光蛋白基因（Green fluorescent protein，gfp）［6］。运用GFP标记无需反应底物，具有易检测、灵敏度高、稳定性好等优点，成为研究微生物与寄主植物相互作用的理想工具［7-10］。国内外多家实验室报道，携带gfp基因的重组载体成功标记与寄主植物互作的微生物，如pGFP4412、pGPE-GFP、pHC60 等［11-13］。

青枯劳尔氏菌（Ralstonia solanacearum）引起的茄科作物青枯病是农业生产上的一个重要细菌病害，从根茎部伤口或次生根根冠进入维管束，最终引起萎焉［3］。柑橘黄单胞柑橘亚种（Xanthomonas citrisubsp.citri）通过气孔和机械伤口进入植物组织，在叶片、果实和茎上都可以造成为害［4］。丁香假单胞菌番茄致病变种（Pesudomonas syringaepv.tomato）也是通过植株自然气孔或伤口侵入，产生圆形或近圆形暗褐色斑［5］。这3种植物病原细菌分别是劳尔氏菌属、黄单胞菌属和假单胞菌属的代表性植物病原细菌，是研究植物-病原微生物互作的模式材料。每种细菌的寄主范围和症状类型不同，柑橘黄单胞柑橘亚种仅在柑橘上引起溃疡症状，青枯劳尔氏菌和丁香假单胞菌番茄致病变种可在多种植物上引起病害，分别引起萎焉和斑点症状。……