，，，　，

(1.川北医学院附属医院耳鼻咽喉科，四川 南充 637000;2.川北医学院附属医院肿瘤科，四川 南充 637000)

白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)作为经典的促炎症细胞因子，可介导组织局部微环境及全身的炎症免疫应答，在感染性疾病、自身免疫性疾病以及肿瘤的发生发展中起着重要作用[1-2]。有文献证实，在肿瘤中IL-6的表达和分泌水平明显增加，并通过其相应的受体直接作用于肿瘤细胞，诱导其分泌基质金属蛋白或上皮间质化，从而有利于肿瘤细胞的增殖和转移[3-4]。此外，IL-6还可以作用于初始CD4+细胞，诱导其分化成熟为Th17细胞，进而通过其效应因子IL-17促进肿瘤细胞分泌促血管因子VEGF-A，诱导新生血管的形成[5]。然而，IL-6在肿瘤中的生物学特性仍未完全阐明。早期研究发现，IL-6能够诱导免疫调节性细胞因子IL-10的表达[6]，提示IL-6可经IL-10参与介导免疫抑制微环境的形成。在鼻咽癌中，肿瘤细胞可高表达IL-6的受体并分泌IL-10[7-8]。基于IL-10在肿瘤免疫抑制中的主导地位，那么，IL-6是否能够诱导鼻咽癌细胞产生IL-10，进而影响肿瘤的进程呢？本研究拟体外培养鼻咽癌细胞系CNE-2细胞并利用IL-6进行刺激，探讨IL-6是否参与诱导鼻咽癌细胞分泌IL-10，并初步阐明其可能的分子机制。

1　材料与方法

1.1　材料

重组人细胞因子IL-6购自美国Peprotech公司，IL-10 ELISA检测试剂盒购自深圳达科为公司，抗IL-6R抗体购自美国Biolegend公司，mRNA提取试剂盒购自美国invitrogen公司，逆转录试剂盒和SYBR Green Real-time PCR Master Mix购自日本Toyobo公司，NF-κB抑制剂(BAY 11-7082)、PI3K抑制剂Wortmannin、p38/MAPK抑制剂(SB203580)、JNK抑制剂(SP600125)、MEK1/2抑制剂(U0126)和STAT3抑制剂(FLLL32)购自美国MedChem Express公司，DMSO购自美国Sigma公司(所有抑制剂均用DMSO进行溶解)，RPIM 1640培养基、胎牛血清以及胰酶均购自美国Hyclone公司，PBS购自北京中杉金桥生物技术有限公司。……