大鼠骨关节炎模型的建立及软骨组织中MMP-13和ADAMTS-5的表达
2018-04-04,,,,
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(安徽医科大学第二附属医院骨科,安徽 合肥 230000)
骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种慢性、进行性、退行性关节病变,是临床上常见的关节疾病之一。该病的发病率与年龄和性别密切相关,病变主要累及全身的大关节,膝关节是其好发关节之一。OA的发病机制目前尚未完全明了,其病理变化主要是关节软骨的丢失及软骨下骨的硬化。OA中关节软骨细胞外基质的降解、合成失衡,进而导致软骨细胞凋亡最终引起软骨丢失。构成软骨基质的骨架部分是主要是Ⅱ型胶原蛋白和聚蛋白多糖。一直以来,基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMPs)家族被认为是降解Ⅱ型胶原和聚蛋白多糖的经典酶类,但近年来研究表明,带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚素与金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif,ADAMTS)家族也在OA的发病中起着重要的作用。在软骨细胞外基质的降解过程中,尤其是MMP-13和ADAMTAS-5发挥着重要作用[1]。本研究采用大鼠膝关节内侧副韧带离断联合内侧半月板切除术制作动物OA模型,并使用Western blot技术和免疫组化方法检测MMP-13和ADAMTAS-5蛋白在造模不同时期表达的变化,旨在用此模型对OA发病机制进行进一步探讨,以期能为临床早期预防、治疗OA提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物、试剂与仪器
SD雌性大鼠40只,体质量(225±25)g,购自安徽医科大学动物实验中心(合格证号:皖医实动准字第01号)。实验于安徽医科大学第二临床学院科研实验中心实施,大鼠自由进食水,昼夜节律12 h∶12 h。实验过程严格遵循安徽省实验动物管理条例执行。抗MMP-13抗体、抗ADAMTS-5抗体(英国Abcam公司);……
