俞晨，张俊强，曹威，王高远，汪陶荣 ，殷瞳昕，陈晓宇*

（1皖西卫生职业学院护理学系，六安 237000；2安徽医科大学组织学与胚胎学教研室，3安徽医科大学第一附属医院骨科，合肥 230022）

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）是慢性关节滑膜炎症，表现为慢性、系统性和破坏性的自身免疫性关节疾病。RA患者表现为成纤维样滑膜细胞（ fi broblast- like synoviocytes，FLS）类肿瘤样生长致关节局部结构破坏[1]。研究证实[2]，RA患者机体存在的氧化应激状态，且促进滑膜组织增生。白藜芦醇（resveratrol，Res）是从葡萄、虎杖等植物中提取的多元酚类植物抗毒素，具有抗炎、抗氧化、抗老化和预防肿瘤的特性[3]。本研究旨在进一步探讨Res对RA患者的抗氧化作用以及自噬在其中的影响。

材料与方法

1 试剂和主要仪器

白藜芦醇（纯度≥99%，美国Aladdin公司）；30%H2O2（北京万佳首化生物科技有限公司）；CCK-8（cell counting kit-8）试剂盒（日本同仁化学公司产品）；DMEM高糖培养基和胎牛血清（FBS）（美国Gibco公司）；超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（glutathion peroxidase，GSH-Px）和丙二醛（malondialdehyde，MDA）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所）；BCA蛋白试剂定量盒（美国Pierce公司）；兔抗人LC3 I/II和兔抗人beclin-1（美国abcam公司）；TUNEL染液、青链霉素溶液、蛋白预染Maker、一抗稀释液、辣根过氧化物酶（HRP）标记的羊抗兔IgG和ECL化学发光液（碧云天生物有限公司）；硝酸纤维素（nitrocellulose，NC）膜（美国Millipore公司）；半干转膜仪（大连竞迈生物科技有限公司）；多功能酶标仪（美国Thermo公司）。

2 MDA、SOD和GSH-Px分光光度计检测

抽取住院RA患者空腹静脉血，离心后置于-20℃冰箱中保存待测。按照说明书操作程序进行MDA含量硫代巴比妥酸法、SOD活性羟胺法和GSH-Px活性比色法检测，进行。同时，取同期门诊健康体检正常人血清作为对照，RA患者和正常人一般情况，包括年龄、性别等差异无显著性，两组具有可比性。……