高 燕，钟素飞，奉树成

(上海植物园 上海城市植物资源开发应用工程技术研究中心，上海 200231)

微型月季(RosachinensisMinima或Rosaroelletti)为蔷薇科多年生木本植物，株型矮小，整体植株不超过30 cm[1]。叶片和花朵娇小，花朵直径3 cm左右，色彩绚丽，单朵花期10 d左右，整株花期可达1个月，适应性强，一年内多次花芽分化，是一种优良的园林绿化和盆栽材料[2]。微型月季因小巧玲珑、花量大、不间断开花、花色绚烂等原因备受人们喜爱。但因株型矮小、节数少，加之受种苗数量、季节等诸多因素的制约[3]，常规扦插和嫁接繁殖方法的繁殖系数低、繁殖速度慢、成本高[4]。为此，特开展微型月季组织培养体系研究，以提高育苗产量，降低成本。

1 材料与方法

1.1 材料

试验于2016—2017年在上海植物园进行。材料取自上海植物园蔷薇园。2016年3月初，取微型月季茎尖部位作为外植体，进行组织培养。

主要试剂包括75%乙醇、0.1% HgCl2、体积分数0.5%的吐温20。纯净水、装有50 mL纯净水的100 mL三角瓶、镊子、托盘、滤纸，121 ℃灭菌18 min备用。

1.2 方法

取微型月季茎段上部较柔软部分1～2 cm(带腋芽)，去除叶片，在加洗洁精的水中清洗20 min，再用流水冲洗1 min。在超净工作台中，将冲洗干净的微型月季茎尖投入装有50 mL纯净水的100 mL三角瓶中清洗1次，然后用75%乙醇振荡清洗30 s、无菌水冲洗2次，再用0.1% HgCl2+体积分数0.5%的吐温20消毒，最后无菌水冲洗5次，滤纸吸干茎段表面水分。

以下培养基配置中如无特殊说明，均须添加蔗糖30 g·L-1、琼脂7.8 g·L-1，并调节pH值至5.8。

1.3 处理设计

1.3.1 灭菌

按1.2节方法操作至加入HgCl2和吐温20，分别灭菌3、6、9 min，用无菌水冲洗外植体5次以尽量减少HgCl2对外植体的伤害。……