黄 磊 综述，张 艺 审校

(北京大学第一医院检验科，北京 100034)

诺卡菌是一群需氧革兰阳性分枝杆菌，可存在于土壤、空气、水、动植物排泄物中，主要通过吸入或破损皮肤侵入人体引起感染，可引起局部或全身感染，好发于免疫功能低下患者(例如器官移植后，使用糖皮质激素，HIV感染等免疫抑制状态)，也可见于健康人[1- 2]。近年来国际上和我国有关诺卡菌感染的报道不断增多，日益受到关注[3-6]。

诺卡菌感染在临床及影像学上缺乏特异性，其诊断往往依靠实验室检测，涂片镜检的灵敏度低且不能鉴定到种，培养出可疑菌落后用生化方法仅有少数几种诺卡菌能鉴定到种[7]。诺卡菌有50多个种，其中脓肿诺卡菌、皮疽诺卡菌、巴西诺卡菌、新诺卡菌、豚鼠耳炎诺卡菌等13个菌种可引起人类感染，且不同菌种对抗菌药物的敏感性不同，所以对早期诊断和治疗，鉴定到种非常重要。

目前只有分子生物学方法能将诺卡菌准确鉴定到种，从早期的PCR扩增目的片段后电泳检测、PCR-限制性核酸内切酶分析、反向点杂交、焦磷酸测序等，发展到目前广泛应用的基因测序(16S rRNA、hsp65、recA1、gyrB和rpoB)、多位点序列分析(MLSA)和质谱(MALDI-TOF MS)技术[7]。以上方法各有优势和局限性，本文对目前广泛应用的3类方法作一综述。

1 基因测序

1.116S rRNA基因 细菌16S rRNA序列内同时存在高度保守和高度变异的区域，是一个稳定的遗传标记，可将细菌鉴定到种水平，获得不依赖表型特征的客观结果，是最早和最广泛用于诺卡菌鉴定的基因[1,8]。但是在诺卡菌中的某些种，该基因存在多拷贝现象，不同拷贝显示为不同的碱基序列，在测序峰图上显示为多个重叠峰。……