郭 华，齐宗利，张海祥，李真真，房国栋，李文生

(陕西省人民医院a.病理科；b.中心实验室，西安 710068)

肺癌是全世界发病率和死亡率最高的肿瘤，非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)是我国肺癌的主要病理类型，占肺癌患者总数的80%～85%，五年生存率仅为10%左右[1]。大部分患者确诊时已为晚期，传统的手术治疗、化学治疗和放射性治疗疗效差，副反应大，总体预后较差[2，3]。研究表明，根据驱动基因突变类型的不同，接受小分子酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors，TKIs)等靶向药物治疗的肺癌患者，其中位生存期明显延长，疗效得到显著改善[3，4]。这些最常见的驱动基因包括表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)、间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase，ALK)和肉瘤致癌因子-受体酪氨酸激酶(ROS proto-oncogene 1 receptor tyrosine kinase，ROS1)等[4，5]。目前，EGFR基因突变的检测已经成为大型医院的常规，但是将EGFR与ALK，ROS1等融合基因在肺癌联合检测的报道并不多。为此，本研究旨在通过对陕西地区NSCLC患者组织标本进行EGFR/ALK/ROS1三种基因的联合检测同时分析其分布情况，为临床靶向治疗提供参考。

1 材料和方法

1.1 研究对象 选取2017年1月～2018年7月陕西省人民医院病理科确诊为NSCLC患者共146例，其中男性93例，女性53例。男女性别比为1.75∶1，年龄30～93岁，中位年龄为61岁，平均年龄为61.9±11.98岁。肺腺癌122例，肺鳞癌21例，腺鳞癌1例， 类癌2例。

1.2 试剂与仪器 核酸提取试剂盒FFPE DNA，FFPE RNA和FFPE DNA &RNA(厦门艾德生物)；人类EGFR/ALK/ROS1基因突变联合检测试剂盒(ARMS-PCR法，RT-PCR法，厦门艾德)；Nanodrop 2000c核酸测定仪(Thermo Scientific)；ABI 7500荧光PCR仪(ABI公司)。

1.3 检测方法 患者标本均来自于手术切除、细针穿刺活检、支气管镜刷检细胞学和胸腔积液细胞学标本等石蜡包埋组织，且每份标本必须经过病理医师镜下鉴定为合格标本方可检测。……