门翔，党强，段秋立，郑大炜

（郑州大学附属南阳市中心医院呼吸内科，河南南阳 473000）

慢性阻塞性肺疾病（Chronic Obstructive Pulmonary Disease，COPD）是临床常见的慢性气道炎症性疾病之一，其临床特征为不可逆的气流受限，主要表现为反复咳嗽、咳痰、气促、进行性肺功能下降。COPD的发病率很高，病死率居世界第4位［1］，慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）是慢阻肺患者死亡的重要因素，也是慢阻肺患者医疗费的主要支出部分。尤其因AECOPD死亡的患者在末次住院期间的医疗费用显著增高，这与生命支持等诊治措施的费用居高不下有关［2］，AECOPD对患者的生命质量和社会经济负担产生巨大的负面影响，因此预防及早发现和早治疗AECOPD是临床上重大的医疗任务。目前已有研究表明，COPD患者细胞免疫功能存在显著异常［3］，但外周血T细胞亚群和COPD产生、发展可能存在相关性的临床研究资料较少。笔者选取郑州大学附属南阳市中心医院呼吸内科收治的120例AECOPD和60例门诊复查的COPD稳定期（SCOPD）患者作为研究对象，分析其外周血中树突状细胞（DC）亚群的水平变化和AECOPD发展间的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取郑州大学附属南阳市中心医院呼吸内科收治的120例AECOPD和门诊复查的60例SCOPD患者作为病例组，选取年龄、性别基本与之相匹配的60例健康人群作为对照组。120例AECOPD患者，男性75例、女性45例，年龄58～84岁，平均年龄（69.2±8.5）岁，其中具有吸烟史48例，合并高血压23例、糖尿病9例；慢性阻塞性肺疾病全球倡议（GOLD）Ⅰ组44例、GOLDⅡ组50例、GOLDⅢ～Ⅳ组26例。60例SCOPD患者，男性42例，女性18例，年龄55～82岁，平均（66.7±8.1）岁。60例健康对照者，男性34例、女性26例，年龄55～85岁，平均年龄（66.9±12.0）岁。三组研究对象的年龄构成、性别比例差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 三组研究对象的性别、年龄比较

1.2 纳入排除标准

1.2.1 纳入标准 （1）COPD患者的诊断及分级标准参考2017年GOLD推荐的标准［4］：基于使用支气管扩张剂后的第1秒用力呼气容积（FEV1）值，GOLDⅠ≥80%预计值，50%≤GOLDⅡ＜80%预计值，30%≤GOLDⅢ＜50%预计值，GOLDⅣ＜30%预计值。AECOPD定义为临床过程表现为呼吸系统症状急性加重，尤其是呼吸困难、咳嗽、咳痰加重和出现脓痰。（2）入院后接受肺功能、血生化等常规检查。（3）所有AECOPD患者均在本院完成治疗，对照组来源于本院体检中心抽取的健康体检对象。（4）本研究报请医学伦理委员会的批准，获得研究对象的知情同意。

1.2.2 排除标准［5］（1）合并呼吸道肿瘤（肺癌等）；（2）各项临床资料不完整的患者；（3）急慢性感染性疾病患者、类风湿性疾病患者。

1.3 血样采集 采集患者外周血标本5 mL，滴入无菌抗凝试管，选择3 200 r·min－1离心10 min，以分离外周血标本，获得上清液，于－70℃条件下冷存备检。

1.4 观察指标及检查方法

1.4.1 观察指标 对比各组研究对象的肺功能指标：FEV1、FEV1／FVC，检测并比较各组研究对象的外周血 C-反应蛋白（CRP）、血沉（ESR）、白细胞计数（WBC）的水平变化；检测并比较各组研究对象外周血DC细胞亚群：CD123＋、CD11＋、mDCs、pDCs的水平差异。

1.4.2 检测方法 取出血检样本使用PBS冲洗3次，每次30 s，使用FAS-Calibur流式细胞仪（购自美国BD公司）进行检测 DC细胞亚群，后使用CellQuest软件分析各DC细胞亚群检测；免疫散射比浊法测定两组的CRP水平，试剂盒购自德国西门子医学诊断产品有限公司。检测仪器是日本日立公司生产7600－020型全自动生化分析仪。WBC计数及ESR测定用美国贝克曼库尔特LH 750型全自动血液分析仪。检测过程严格按照说明书进行。

1.5 统计学方法 数据分析及统计在专业软件SAS9.0软件包中处理，计量指标采用x±s表示，多组间比较采用方差分析，组间两两比较采用SNK-q检验；相关性分析采用Pearson分析法；P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各组肺功能指标比较 AECOPD患者中GOLDⅠ组、GOLDⅡ组、GOLDⅢ～Ⅳ组及SCOPD组的FEV1、FEV1／FVC（%）值均小于对照组，均差异有统计学意义（P＜0.05），SCOPD组及AECOPD患者的 FEV1、FEV1／FVC（%）值比较发现：SCOPD组＞GOLDⅠ组＞GOLDⅡ组＞GOLDⅢ～Ⅳ组，均差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 各组肺功能指标比较／（%，x±s）

2.2 各组炎症相关指标比较 AECOPD患者中GOLDⅠ组、GOLDⅡ组、GOLDⅢ～Ⅳ组的CRP、ESR、WBC值均大于SCOPD组及对照组，均差异有统计学意义（P＜0.05），AECOPD患者的 CRP、ESR、WBC值比较发现GOLDⅠ组＜GOLDⅡ组＜GOLDⅢ～Ⅳ组，均差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 各组炎症相关指标比较／x±s

2.3 各组DC细胞亚群测定 AECOPD患者中GOLDⅠ组、GOLDⅡ组、GOLDⅢ～Ⅳ组及SCOPD组的 mDCs、pDCs细胞比例均大于对照组、CD123＋、CD11＋细胞比例小于对照组，均差异有统计学意义（P＜0.05），AECOPD患者的 mDCs、pDCs细胞比例比较发现GOLDⅠ组＜GOLDⅡ组＜GOLDⅢ～Ⅳ组，CD123＋、CD11＋细胞比例组间比较为GOLDⅠ组＞GOLDⅡ组＞GOLDⅢ～Ⅳ组，均差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

2.4 病例组患者FEV1水平与DC细胞亚群的相关性分析 AECOPD患者的FEV1%值与mDCs、pDCs细胞比例值呈显著负相关（r＝－0.339，－0.284）；AECOPD患者FEV1%值与CD123＋、CD11＋细胞比例值呈显著正相关（r＝0.269，0.302）。见表5。

表5 AECOPD患者FEV1水平与DC细胞亚群的相关性分析／x±s

3 讨论

在呼吸内科临床中，COPD属于常见、高发型呼吸系统炎症，其病程发展具有进行性、逐步性及阶跃性的特点［6］，患者中气道的炎性反应是最为明显，且可进一步恶化为高反应性急性气道炎症［7］。AECOPD患者常合并严重肺部炎症，可导致其出现全身性、系统性呼吸障碍等不良反应［8］，且可致机体呈现级联式的病症表现，能够累及心脏和心血管，形成中、重度心血管疾病，严重者会出现急性呼吸衰竭，致临床急救难度较高，故AECOPD具有难预防、难治疗、病死率高等特点，为呼吸内科临床中主要顽疾之一。在本研究中，AECOPD患者中GOLDⅠ组、GOLDⅡ组、GOLDⅢ～Ⅳ组的FEV1、FEV1／FVC值均小于对照组，均差异有统计学意义（P＜0.05），而AECOPD患者中，GOLDⅠ组患者的FEV1、FEV1／FVC（%）值最高，其次为 GOLDⅡ组，最低为GOLDⅢ～Ⅳ组，均差异有统计学意义（P＜0.05）；这表明AECOPD可诱发不同程度的呼吸功能障碍甚至衰竭，其原因可能为患者肺部合并感染和（或）炎症相关。

相关文献报道称AECOPD患者合并肺部感染概率较高，并可显著增加其呼吸道和肺实质的炎性反应，这是因为COPD合并肺部感染概率较高，约为35.5%［9］，而肺部感染还可进一步导致肺功能下降，加重肺损伤程度；同时COPD属于慢性病，使得其对肺部组织侵害处于不断发展的状态，当该病患者出现突发性炎症激发反应即进入AECOPD病发期时，其免疫功能较正常水平呈现显著降低，外周血内各T淋巴细胞亚群均明显减少。有研究显示［10］，即使AECOPD患者病情趋于缓解和稳定时，其机体防御和免疫系统也会出现异常性障碍，导致其肺及呼吸道易被病菌侵袭感染。本研究表明，AECOPD患者中 GOLDⅠ组、GOLDⅡ组、GOLDⅢ～Ⅳ组的CRP、ESR、WBC值均大于对照组（P＜0.05），因此，我们认为固有及获得性免疫异常 T淋巴细胞和COPD炎症产生及发展、急性程度间具有相关性；AECOPD患者中，GOLDⅠ组的 CRP、ESR、WBC值最低，其次为 GOLDⅡ组，最高为 GOLDⅢ～Ⅳ组，均差异有统计学意义（P＜0.05）；这表明患者炎症程度越重，其血清内相关炎性因子指标表达越高，清晰证明AECOPD患者机体具有不同程度免疫系统功能缺陷，导致正常的抗炎、清除细菌的免疫应答不能有效发挥。

表4 各组DC细胞亚群测定／（%，x±s）

DC能够增强初始性T细胞的抗原活性，并诱导该类T细胞复制及增殖，提高细胞免疫应答效能，同时介导细胞毒性和辅助性两类T淋巴细胞数量上升，促使他们参与人整体免疫系统答应。研究显示，根据DC细胞来源，可将其分为外源性髓样DC与内源性浆细胞样DC，而它们均可增强COPD患者肺组织内T淋巴细胞活性［11］，并调节和介导B细胞功能发挥。其作用机制为外源性抗原需激活DC生理功能，并将其传导给CD8＋；内源性抗原加工DC后，促使其和T细胞膜表面相互结合，通过黏附素辅助传导给CD4＋。从某种意义上，在人体免疫系统激活体系中，DC属于启动因子，并对COPD产生和发展过程具有显著的影响作用，而通过测定外周血内DC数量能够有效评估患者免疫现状态［12-13］，为临床预防 AECOPD及治疗 COPD、AECOPD提供高价值的指导。本研究中，AECOPD患者的mDCs、pDCs细胞比例均大于对照组，CD123＋、CD11＋细胞比例小于对照组（P＜0.05），同时AECOPD患者的 mDCs、pDCs细胞比例比较发现，GOLDⅠ组最低，Ⅱ组其次，Ⅲ～Ⅳ组最高，相应的CD123＋、CD11＋细胞比例组间比较为GOLDⅠ组最高，GOLDⅡ组其次，GOLDⅢ～Ⅳ组最低，均差异有统计学意义（P＜0.05）；结果证明AECOPD患者机体内DC亚群表达异常，导致免疫答应功能障碍，而患者炎症程度越重，其DC亚群表达异常越明显，稳定期患者的异常程度明显低于急性加重期，本研究中，AECOPD患者的FEV1值与mDCs、pDCs细胞比例值呈显著的负相关、与CD123＋、CD11＋细胞比例值呈显著的正相关，表明AECOPD患者肺功能障碍或呼吸衰竭和DC亚群间具有显著相关性，其原因可能为相关炎性细胞活性上升或表达异常，从而导致人体免疫功能障碍，造成肺和呼吸道损伤或出现炎性反应。

综上所述，AECOPD患者外周血内DC细胞亚群水平可呈现显著改变，能够导致患者炎症产生、发展，并和炎症严重程度具有明显相关性，这表明DC细胞亚群与患者炎性反应过程有关，为我们临床预防和治疗AECOPD提供有效指导。

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