重楼醇提物对三种神经胶质瘤细胞株的细胞毒性研究
2018-02-01
云南省楚雄州中医医院,云南 楚雄 651000
重楼来源于百合科植物云南重楼ParispolyphyllaSmith var.yunnanensis(Franch.)Hand.-Mazz.或七叶一枝花ParispolyphyllaSmith var.chinensis(Franch.) Hara的干燥根茎[1]。其性苦、微寒,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊、止咳平喘的功效,在痈肿疔疮、咽喉肿痛、毒蛇咬伤、抽搐惊风、跌打扭伤等症治疗中均有很好的疗效。扶正、祛邪是传统中医药在肿瘤治疗方面的两大基本原则,其中清热解毒为最主要的祛邪手段之一[2]。重楼组方对恶性肿瘤的热症及实症有一定的治疗效果,在恶性肿瘤治疗方面的作用越来越受到研究者的关注,重楼对正常细胞毒性较小、抗肿瘤谱广,重楼水提物、醇提物及其主要活性成分重楼皂苷和一些重楼单体(如皂苷I、Ⅱ、IV、gracillin、methylmotogracillin、重楼皂苷D等)在体外对食管癌、胃癌、直肠癌、肝癌、胰腺癌、宫颈癌、乳腺癌等多种实体癌均有较强的细胞毒性作用[3]。研究应用乙醇冷浸法对重楼饮片进行提取,通过聚酰胺柱层析分离划段获得重楼醇提物的不同分离部位样品,改良MTT法对人类神经胶质瘤细胞株(U251、U87、T98G)进行细胞毒性检测,二甲基亚砜(DMSO)设为空白对照组,顺铂(DPP)为阳性对照组,对活性测试结果进行分析比较,初步探讨重楼醇提物的体外抗肿瘤活性。
1 材料与方法
1.1 细胞株与实验试剂 人神经胶质瘤细胞株(U251、U87、T98G)购自中国科学院上海细胞库;RPMI-1640培养基(Gibco公司);胎牛血清(浙江天杭生物科技有限公司);顺铂(DDP,山东齐鲁制药厂);3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、EDTA、胰蛋白酶、DPBS均购自江苏碧云天生物技术有限公司;其余有机试剂均为国产分析纯,购自上海国药集团化学试剂有限公司。……
