磷脂酶D1在乳腺癌细胞中的表达及雷公藤甲素的干预作用
2017-12-06顾取良郐一贺陈佳园李江超王丽京广东药科大学基础学院血管生物学研究所广东广州510006
顾取良,郐一贺,陈佳园,李江超,王丽京 (广东药科大学基础学院血管生物学研究所,广东广州510006)
磷脂酶D1在乳腺癌细胞中的表达及雷公藤甲素的干预作用
顾取良,郐一贺,陈佳园,李江超,王丽京 (广东药科大学基础学院血管生物学研究所,广东广州510006)
目的:探讨磷脂酶D1(PLD1)在不同乳腺癌细胞中的表达情况以及雷公藤甲素(TP)对人乳腺癌细胞PLD1表达的影响.方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231和小鼠乳腺癌细胞4T1,以人乳腺上皮细胞MCF10A为对照,采用半定量RT-PCR测定PLD1 mRNA表达水平,Western blot法测定PLD1蛋白表达水平,并分别测定不同浓度 TP对PLD1及细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA和蛋白的表达水平的影响.结果:半定量RT-PCR和Western blot分析均显示,PLD1 mRNA和蛋白在乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231和4T1中的表达显著高于乳腺上皮细胞MCF10A,其中MDA-MB-231细胞PLD1蛋白表达水平约为MCF10A细胞的20倍.TP抑制人乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖的同时下调PLD1和cyclin D1表达水平,并且呈一定浓度依赖性.结论:相比乳腺正常上皮细胞,PLD1 mRNA和蛋白在乳腺癌细胞中表达增高,TP抑制乳腺癌细胞增殖的作用机制与其抑制PLD1的表达有关.
磷脂酶D1;乳腺癌细胞;乳腺上皮细胞;雷公藤甲素
0 引言
磷脂酶D(phospholipase,PLD)是一类能够催化磷脂酰胆碱水解的酶,哺乳类动物常见 PLD1和PLD2两种亚型.PLD水解作用产物磷脂酸、二脂酰甘油及溶血磷脂酸等均可作为细胞内重要的第二信使,参与调控许多生理和生化过程信号通路如调节细胞生长、增殖、存活、迁移等[1].PLD在肿瘤的发生、分化、凋亡及转移等过程中扮演重要的角色[2-3],已有文献[4-6]表明,在多种肿瘤组……
