赫 童， 杨双双， 邓铃俊， 严 立， 张莉萍

2010－2016年重庆一医院肠道外气单胞菌耐药性分析

赫 童， 杨双双， 邓铃俊， 严 立， 张莉萍

目的了解近7年间重庆一医院肠道外分离的气单胞菌对临床常用药物耐药情况，为临床合理选择抗菌药物提供客观依据。方法回顾性分析2010｜2016年住院患者肠道外分离的非重复气单胞菌株的临床分布特征并对14种抗菌药物的体外药敏结果进行判读，采用WHONET5.6软件进行数据分析。结果2010｜2016年共分离肠道外非重复气单胞菌230株，以嗜水气单胞菌最为常见，占83.0%，其次为维氏气单胞温和生物变种，占14.8%。主要分离自伤口分泌物，其次为胆汁和尿液。气单胞菌对甲氧苄啶-磺胺甲 唑耐药最为严重，耐药率为46.8%，其次为头孢曲松（37.0%）和头孢呋辛（28.8%），对氨曲南、头孢吡肟、环丙沙星的耐药率在10%以上。对哌拉西林-他唑巴坦、头孢西丁、左氧氟沙星、阿米卡星和庆大霉素以及碳青霉烯类抗菌药物的耐药率低于10%。其中，对亚胺培南耐药率为4.0%，对美罗培南耐药率为1.7%。除对哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南和阿米卡星外，嗜水气单胞菌对其他抗菌药物耐药率均高于维氏气单胞温和生物变种。尚未发现维氏气单胞温和生物变种对美罗培南耐药菌株。结论该院临床分离气单胞菌肠道外感染以嗜水气单胞菌和维氏气单胞温和生物变种为主。气单胞菌科不同菌种对抗生素的耐药率有差别。由于气单胞菌对甲氧苄啶-磺胺甲 唑和第三代头孢菌素耐药较为严重，临床应慎重使用。

气单胞菌； 耐药性； 头孢曲松； 甲氧苄啶-磺胺甲 唑； 碳青霉烯类抗生素

气单胞菌科细菌为革兰阴性杆菌，成球杆状或丝状，绝大多数有极端单鞭毛，是一种水域性兼性厌氧菌，生长于淡水、河水及海水中。根据DNA杂交结果可分为14个基因种或DNA杂交群。气单胞菌科细菌为条件致病菌，是人-兽-鱼共患病原菌，引起海产品感染较常见。常见致人类疾病有8个种，包括嗜水气单胞菌种、豚鼠气单胞菌种、维氏气单胞温和生物变种、简氏气单胞、舒氏气单胞等。可以引起人类的肠外感染和肠内感染，例如败血症，蜂窝组织炎，胆囊炎，眼、关节、肺部、腹腔内感染，肠胃炎及血流感染等，患者常有免疫功能低下，预后差，致死率高[1]。通常气单胞菌引起的肠道内感染多为自限性，而气单胞菌肠道外感染需要作体外药敏试验。研究表明，大多数气单胞菌属对氨苄西林、头孢唑林、氨苄西林-舒巴坦和阿莫西林-克拉维酸耐药率较高，对广谱的头孢菌素、氨基糖苷类和喹诺酮类抗菌药物敏感。不同菌种间气单胞菌属的药物敏感率存在差异。随着气单胞菌耐药率的逐渐增高和2015年10月CLSI M45-A3对气单胞菌部分药敏折点进行修订[2]，为了解气单胞菌的分布特征以及耐药性变迁，对重庆医科大学附属第一医院2010

年1月—2016年12月罹患气单胞菌肠道外感染的患者临床分布特征和药敏数据结果进行统计分析，以期为指导临床合理用药、控制医院感染提供资料，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1菌株来源 2010年1月—2016年12月本院检验科在临床肠道外培养标本中分离的非重复气单胞菌株。

1.1.2仪器与试剂 血平皿、VITEK-MS质谱分析仪、VITEK 2-Compact 全自动微生物药敏系统均购于法国生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2细菌鉴定和药敏 采用VITEK-MS仪进行鉴定；采用VITEK 2-Compact 全自动微生物药敏系统进行体外药敏试验。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.2.2药物敏感性结果分析 将头孢呋辛、头孢曲松、甲氧苄啶-磺胺甲唑、头孢他啶、氨曲南、环丙沙星、头孢吡肟、庆大霉素、哌拉西林-他唑巴坦、左氧氟沙星、阿米卡星、亚胺培南、美罗培南、头孢西丁共14种常用治疗气单胞菌感染药物纳入统计。气单胞菌体外药敏试验结果解释标准参考2015年CLSI-M45-A3执行。

1.2.3统计学方法 采用WHONET5.6软件对数据进行统计。

2 结果

2.1 气单胞菌的不同科室分布及构成

7年来我院共检出非重复气单胞菌230株，分布在20个科室，其中来自骨科53株，占23.0%；肝胆外科42株，占18.3%；重症医学科30株，占13.0%。来自非监护室200株，占87.0%。

2.2 气单胞菌的不同标本分布及构成

以手术伤口分泌物检出最多，共70株，占30.4%；其次为胆汁35株，占15.2%；尿液34株，占14.8%；痰液23株，占10.0%；其他肠道外标本检出68株，占29.6%。

2.3 气单胞菌不同种属分布及构成

230株非重复菌株，由嗜水气单胞菌、维氏气单胞温和生物变种以及杀鲑气单胞菌构成，其中嗜水气单胞菌191株，占83.0%，维氏气单胞温和生物变种34株，占14.8%。嗜水气单胞菌从2011年起，检出有所增加。

2.4 气单胞菌对14种抗菌药物的耐药性变迁

表1 2010 －2016年气单胞菌对14种抗菌药物的耐药性变迁Table 1 Changing antimicrobial susceptibility profiles of Aeromonas isolates to 14 antimicrobial agents from 2010 to 2016（%）

嗜水气单胞菌与维氏气单胞温和生物变种耐药性比较，除哌拉西林-他唑巴坦、亚胺培南、阿米卡星外，嗜水气单胞菌对其他抗菌药物的耐药率均高于维氏气单胞温和生物变种菌。11株碳青霉烯类耐药的菌株中，有2株对美罗培南和亚胺培南均耐药，皆为嗜水气单胞菌；9株对亚胺培南耐药，其中嗜水气单胞菌5株，维氏气单胞温和生物变种4株。未发现对美罗培南耐药维氏气单胞温和生物变种。见表2。

表2 不同种气单胞菌对抗菌药物的耐药率和敏感率Table 2 Antimicrobial susceptibility of Aeromonas hydrophila versus Aeromonas sobria

3 讨论

目前国内对气单胞菌感染导致人类疾病报道，多见于群体腹泻、皮肤软组织感染、肝硬化等个案报道。而国外报道以肠外感染为主，如伤口感染，尿路感染等。但对于其不同地区、不同菌种耐药性的报道不多[1，3-7]。由于近年来气单胞菌的耐药率不断增高，气单胞菌科的体外药敏解释标准也发生了变化。2015年CLSI-M45-A3删除了阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、头孢唑林折点，首选试验药物中删除了阿莫西林-克拉维酸，并参考肠杆菌科的折点，修订了头孢吡肟、厄他培南、亚胺培南和美罗培南的折点。因此，以新折点作为解释标准，为临床提供最新的体外药敏参考实属必要。

本院肠道外分离的嗜水气单胞菌及维氏气单胞温和生物变种菌的数量明显高于其他类型的气单胞菌，与上海及北京地区的腹泻流行病学研究结果一致[6-8]。本院在2010—2014年共检出5株杀鲑气单胞菌，均分离自痰液，提示杀鲑气单胞菌亦可能引起下呼吸道感染。另外随着气单胞菌基因分型技术的应用[9]，气单胞菌属已划分为气单胞菌科，新的亚种例如A. hydrophila subsp. Dhakensis等不断被检出，临床对气单胞菌科细菌感染范围和认识进一步深入。从本院的临床标本种类和科室分布特征分析，肠道外气单胞菌感染可能与医院获得性感染有关，但是与其他气单胞菌肠道外感染报道不同，本院肠道外气单胞菌感染最常见于伤口感染而非败血症[10-11]。

值得重视的是本院已分离出耐碳青霉烯类药物的气单胞菌，耐药率与万颖等[13]报道一致，应引起临床的高度重视。目前气单胞菌对β内酰胺类药物耐药主要有2种机制：①为染色体介导的β内酰胺酶即金属β内酰胺酶、诱导型头孢菌素酶以及青霉素酶类[14-15]；②产ESBL。本院分离菌对头孢曲松耐药率较高，可能提示菌株产ESBL或AmpC酶。金属β内酰胺酶中以cphA最为常见。研究表明Carba NP试验能够很好地检测cphA金属酶，其阳性预测值为98.2%，特异性为95.7%[14-15]。另外，本院肠道外感染气单胞菌对亚胺培南耐药率高于美罗培南，其机制可能是由于cphA对不同碳青霉烯类药物水解的酶动力学差异所致，Bottoni等[16]发现野生型cphA对亚胺培南的Kcat/Km（催化效率）为4.18 μmol/s，而对美罗培南的催化效率仅为1.94 μmol/s，推测亚胺培南较美罗培南更易于被cphA水解，故在体外药敏试验中，表达cphA金属酶的气单胞菌更易于对亚胺培南耐药。随着气单胞菌属中可移动基因元件（mobile genetic elements）的逐渐被发现，气单胞菌的医院感染亦逐渐引起临床和院感监控部门的重视[17]，因此在使用头孢菌素类或碳青霉烯类抗生素治疗气单胞菌肠道外感染时应注意耐药性的变化。

综上所述，临床治疗气单胞菌感染时，应根据感染部位和分离菌的种类区别对待。进行治疗时应减少对第三代头孢菌素的使用，以避免产酶株的快速出现，减缓细菌耐药基因的传播。同时，对于气单胞菌检出较高的科室，应加强院感监测，做好隔离防护措施，减少医院感染的发生。

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Antimicrobial resistance profile of the Aeromonas strains isolated from extraintestinal specimens in a hospital in Chongqing

HE Tong, YANG Shuangshuang, DENG Lingjun, YAN Li, ZHANG Liping.
（Department of Laboratory Medicine,the First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing400016, China）

ObjectiveTo evaluate the antibiotic resistance profile of theAeromonasstrains isolated from extra-intestinal specimens during 7-year period in a tertiary hospital in Chongqing for appropriate antibiotic treatment.MethodsWHONET 5.6 software was used to analyze the clinical data and results of antimicrobial susceptibility testing ofAeromonasstrains to 14 antibiotics according to CLSI breakpoints (CLSI-M45-A3).ResultsA total of 230 non-duplicateAeromonasstrains were collected from January 2010 to December 2016. The most common species wereAeromonas hydrophila(83.0%) andAeromonas sobria(14.8%). Majority of the strains were isolated from wound secretion, bile and urine. Overall, 46.8% of theAeromonasisolates were resistant to trimethoprim-sulfamethoxazole, followed by ceftriaxone (37.0%) and cefuroxime (28.8%). More than 10% of the strains were resistant to aztreonam, cefepime and ciprofloxacin. More than 90% of the strains were susceptible to piperacillin-tazobactam, cefoxitin, levofloxacin, gentamicin, amikacin, imipenem and meropenem. Only 4.0% and 1.7% of the strains were resistant to imipenem and meropenem, respectively.Aeromonas hydrophilashowed higher antibiotic resistance thanAeromonas sobriato all the antibiotics tested except piperacillin-tazobactam, imipenem, and amikacin. None of theAeromonas sobriaisolates was found resistant to meropenem.ConclusionsTheAeromonas hydrophilaandAeromonas sobriaisolates are the dominantAeromonasspecies in Chongqing. The antibiotic resistant profiles vary withAeromonasspecies and site of infection. The use of third generation cephalosporins and trimethoprim-sulfamethoxazole should be cautious inAeromonasinfection due to the highresistance level.

Aeromonas; antibiotic resistance; ceftriaxone; trimethoprim-sulfamethoxazole; carbapenem

R378

A

1009-7708 ( 2017 ) 06-0653-05

10.16718/j.1009-7708.2017.06.008

重庆市科学技术委员会基础与前沿一般项目（cstc2016jcyjA0248）。

重庆医科大学附属第一医院检验科，重庆 400016。

赫童（1995—），男，本科生，重庆医科大学附属第一医院实习生。

杨双双，E-mail：doctoryoung2010@163.com。

2017-01-23 修回日期：2017-05-11