潘训彬+张秀霞+冼健安

摘 要：氨氮是水产养殖过程中的常见毒性污染物之一，为探讨氨氮对红螯螯虾（Cherax quadricarinatus）血细胞的细胞毒性机制，研究了氨氮胁迫作用下红螯螯虾血细胞凋亡状态的变化。以17.6 mg/L氨氮对红螯螯虾幼虾进行急性胁迫，于胁迫后的0、48、72和96 h取血淋巴，应用流式细胞术测定血细胞总数（THC）、胞内游离Ca2+含量、线粒体膜电位（MMP）和血细胞凋亡率。结果显示，红螯螯虾的THC在胁迫的72 h开始有显著的下降，在96 h时达到最低值；血细胞胞内游离Ca2+含量在48 h开始有显著的升高，在96 h达到最高值；血细胞MMP在72 h开始有显著的下降，在96 h达到最低值；血细胞凋亡率在72 h开始有显著的升高，在96 h时达到最高值，为9.39%。这些结果表明，胞内游离Ca2+含量是对氨氮胁迫最为敏感的指标；氨氮急性胁迫诱导红螯螯虾血细胞发生了Ca2+参与调节、线粒体通路相关的细胞凋亡，从而导致了THC的下降。

关键词：氨氮；红螯螯虾（Cherax quadricarinatus）；血细胞；凋亡；流式细胞术

中图分类号：X503.225文献标识码：A

水产养殖过程中，水体氨氮主要来源于水产动物的氮代谢排泄物以及粪便和残饵的氨化作用[1]。众多研究表明，氨氮对水产动物具有较强的毒性[2-4]。随着养殖时间的延长，氨氮容易不断地积累于水环境中，从而对养殖水产动物产生胁迫毒害作用。目前，氨氮对红螯螯虾毒性影响的研究仍甚少，主要集中在半致死浓度以及氨氮对生理生化的影响上[5-6]。虾类等甲壳动物依赖先天性免疫进行免疫防御，其中血细胞在细胞免疫和体液免疫过程中具发挥十分重要的作用。……