赵春梅

(江苏省如皋市长江高级中学，江苏 如皋 226532)

一组关于限制酶试题的解题方法

赵春梅

(江苏省如皋市长江高级中学，江苏 如皋 226532)

限制酶主要存在于微生物中.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子.它作用的部位是两个核苷酸之间的磷酸二酯键.

高中生物；限制酶

限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线，中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的(如右图).DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端(如下图).尽管微生物中含有某种限制酶，但它不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵.

例1 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选.已知限制酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是-↓GATC-.根据图示判断下列操作正确的是( ).

A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割

C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割

分析要想正确解答此题，首先要弄清两个问题：1.两个标记基因中至少要有一个保持完整性，因为重组质粒要具有标记基因，便于进行筛选；2.限制酶II也能识别限制酶I的识别序列.搞懂上述两个问题后，下面我们请看：质粒应用限制酶Ⅰ切割，而不能用限制酶Ⅱ切割，因为限制酶Ⅱ将破坏两个标记基因；……