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UF-1000i检测尿液红细胞的应用分析

2017-11-16纪凤卿林丽云张美雪陈君颖

中国医药科学 2017年21期
关键词:尿沉渣分析仪显微镜

纪凤卿 滕 菁 林丽云 张美雪 陈君颖

福建中医药大学附属厦门市中医院检验科,福建厦门 361009

UF-1000i检测尿液红细胞的应用分析

纪凤卿 滕 菁 林丽云 张美雪 陈君颖▲

福建中医药大学附属厦门市中医院检验科,福建厦门 361009

目的 分析 UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿液红细胞出现假阳性,假阴性的各种因素,提出相应的解决方案。方法 对518例门诊及住院尿液标本分别用干化学分析法﹑显微镜和 UF-1000i分析仪进行尿液有形成分检测,并收集尿液红细胞的检测数据。以尿液干化学法和显微镜检法两种方法来判定红细胞检测真阳性﹑真阴性标准。 结果 显微镜镜检法和UF-1000i尿液分析仪法的阳性率分别是36.49%﹑40.15%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。以尿液干化学法和镜检法检测红细胞同时为阳性为真阳性标准,UF-1000i分析仪法假阳性率为3.67%, 以尿液干化学法和镜检法检测红细胞同时为阴性为真阴性标准,UF-1000i分析仪法假阴性率为3.86%。引起UF-1000i假阳性的因素有孕妇阴道分泌物﹑草酸钙结晶﹑细菌﹑其他盐类结晶,分别占比例为42.10%﹑21.05%﹑10.53%﹑26.32%。引起UF-1000i假阴性的因素为红细胞溶解或可能由于荧光染色敏感度下降造成仪器漏检。结论 本实验表明 UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿液红细胞必须结合干化学法﹑显微镜检测,以提高结果的准确性。

UF-1000i尿沉渣分析仪;显微镜镜检;红细胞;假阳性;假阴性;镜检规则

准确可靠的尿液检测结果才能为临床疾病诊断提供科学的诊断依据。UF-1000i尿液分析仪是日本 Sysmex 公司近年推出的最新的尿液有形成分定量分析系统。UF-1000i采用流式细胞仪技术,区分尿中各种有形成分,具有操作简单﹑快速高效﹑重复性好[1]等的特点。其在尿液红细胞检测中的广泛应用,有利于泌尿系统疾病的诊断﹑鉴别诊断和预后判断等。 具有精密度高﹑检测效率高﹑重复性好等优点[2-3]。然而尿液成分比较复杂﹑影响因素多加上仪器本身的局限性,因此在日常的检测过程中,我们发现UF-1000i尿沉渣分析仪对尿液红细胞的检测存在一定的假阳性﹑假阴性现象。本研究随机选取本院2017年1~6月518份尿液标本同时采用京都干化学分析仪﹑显微镜检查法与UF-1000i尿沉渣分析仪进行尿液红细胞分析,统计UF-1000i尿沉渣分析仪检测尿液红细胞存在假阳性率﹑假阴性率,并将这两种检测方法结果进行比较分析。以尿液干化学法和显微镜检法两种方法来判定红细胞检测真阳性﹑真阴性标准。同时分析UF-1000i尿液分析仪检测尿液红细胞的干扰因素,产生假阳性,假阴性的原因并提出相应解决方案。

1 材料与方法

1.1 标本来源

随机选取本院2017年1~6月份住院及门诊尿液标本518例,其中男218例,女300例,年龄3~85岁,平均46岁。

1.2 仪器和试剂

京都干化学分析仪;日本sysmex公司 UF-1000i尿液分析仪,配套试剂及质控品,Olympus公司CX-21双目显微镜。 标本处理采用SC2542低速离心机离心。

1.3 检测方法

按照本科室仪器操作规程完成室内质控检测,确保仪器检测的准确性。所收集的住院及门诊尿液均是中段尿,混匀后倒入一次性尿管约10mL。先用于京都干化学分析仪﹑ UF-1000i分析仪检测,然后用CX-21显微镜检测。离心镜检时按照《全国临床检验操作规程》[4]操作,取10mL新鲜混匀的尿于离心管,离心5min,转速1500r/min,弃去上清液,剩余尿液0.2mL混匀后进行尿液红细胞镜检。

1.4 结果判断标准

UF-1000i检测尿液红细胞阳性标准: 女性 红细胞>15.0 个/µL﹑男性红细胞>18个/µL;显微镜镜检阳性标准:红细胞>3 个/HP;干化学法阳性标准:隐血为(±)﹑(+)﹑(2+)﹑(3+)。

1.5 统计学方法

计数资料以百分率表示,组间比较采用χ2检验,运用 SPSS18.0统计软件进行数据处理。当P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 显微镜检查法与UF-1000i尿沉渣分析仪两种方法检测尿液红细胞的结果

运用显微镜检查法与UF-1000i尿沉渣分析仪对518份尿液标本进行尿液检测,并收集有关红细胞检测数据。其中显微镜镜检法和UF-1000i法的阳性率分别是36.49%﹑40.15%,见表1,两者比较χ2=1.474,P=0.225,差异无统计学意义(P > 0.05)。以尿液干化学法与镜检法检测红细胞同时为阳性为真阳性标准, UF-1000i检测出现假阳性19例,假阳性率为3.67%, 以尿液干化学法和镜检法检测红细胞同时为阴性为真阴性标准,UF-1000i检测出现假阴性20例,假阴性率为3.86%,具体见表2。

2.2 UF-1000i检测518份尿液红细胞假阳性结果

标本518份尿液标本经 UF-1000i检测尿液红细胞,出现19例假阳性结果见表3。各种干扰物(孕妇阴道分泌物﹑草酸钙结晶﹑细菌﹑其他盐类结晶)所占比例分别为42.10%﹑21.05%﹑10.53%和26.32% 。

表1 UF-1000i和显微镜镜检法检测尿液红细胞结果[n(%)]

表2 UF-1000i检测518例尿液红细胞假阳性﹑假阴性结果

3 讨论

尿液红细胞及其形态学的检测作为尿液有形成分的一项重要检测项目,有助于泌尿系统疾病的诊断﹑治疗﹑监测[5]。由表1可知,518份尿液标本分别经 UF-1000i和显微镜镜检法检测其阳性率分别是40.15%﹑36.49%,二者相比差异无统计学意义(P>0.05)。由表2可知,UF-1000i分析仪检测尿液红细胞快速高效﹑灵敏度高﹑重复性好,然而特异度仍不理想,其因素与文献报道[6]一致。对红细胞的检测产生最大影响干扰物属草酸钙结晶和其他盐类结晶,占47.35%,与郭志强[7]的报道一致。我们的研究认为是由以下原因导致:尿液中的各种结晶如草酸钙结晶﹑细菌和酵母菌等干扰物的前向荧光强度﹑前向光散射强度等各项检测指标与红细胞存在一定的相似之处,而UF-1000i尿液分析仪是根据尿液中的各种细胞﹑细菌﹑管型等的大小﹑形状﹑内部结构及结合荧光染料的不同进行识别检测,因此极易出现检测识别错误[8]。故当尿液中存在大量上述成分时,尿沉渣仪检测红细胞时就出现假阳性结果[9],也与宋尉等[10]学者的研究结果一致。人工显微镜镜检为离心标本,由检验技师主观判别红细胞存在与否,检验技师人员细胞形态学水平参差不齐,加上离心吸样误差,不免导致红细胞计数结果有一定差异。因此势必导致UF-1000i仪器法与人工镜检红细胞阳性率性有差异,但是在本研究所设计的实验中该差异无统计学差异。这与国内诸多学者研究结论有一定差异,我们认为该差异来源于对于所认定真阳性,真阴性结果的标准不一致造成。

表3 UF-1000i检测尿液红细胞假阳性结果分析

本研究还发现在这些假阳性产科的孕妇标本中存在较大比例为42.10%,红细胞略高于我们的参考值范围,经人工镜检发现均为阴性。我们认为这部分假阳性是受孕妇本身生理影响所致。因孕妇阴道分泌物较多,分泌物颗粒在UF-1000i 仪器检测的散点图上与红细胞形态﹑大小存在一定交叉分布而导致仪器出现假阳性红细胞。该结论与国内学者赵琴等,赖元珍等研究一致,及对孕妇尿液有形成分分析常出现一定假阳性﹑假阴性结果,假阳性率高于普通人群[11-12]。对于此部分的假阳性我们提倡建立产科标本自己独立的红细胞参考值,以减少人工镜检率,提高检测工作效率。此外本研究发现当尿液尿pH>8.0﹑比重<1.005或者尿液红细胞处于低渗透压时,红细胞均易破坏,另外尿液出现影细胞或者小红细胞等高度异形性时,也将引起 UF-1000i检测出现假阴性红细胞结果[13]。本研究 UF-1000i 的假阴性率为3.86%,产生的原因主要可能为荧光染色敏感度下降造成漏检或者红细胞溶解[14]。

对于UF-1000i 检测假阳性,假阴性情况,我们认为有必要建立一套完整严格的红细胞镜检规则以保证尿中红细胞计数可靠高效。本科室目前采用只要以下规则[15]:(1) 干化学红细胞阴性,UF-1000i尿沉渣分析仪红细胞阳性,结晶﹑酵母菌﹑细菌数超出参考值范围即镜检。(2) 尿京都干化学分析仪﹑尿沉渣分析仪有一种方法检测 RBC 为阳性,需离心涂片镜检。(3)尿京都干化学分析仪﹑尿沉渣分析仪两者检测均为阴性,可直接发出报告。对于尿液结晶,细菌导致假阳性率,我们认为应重视尿液标本检验前质量,住院尿液严格把控尿液送检﹑检测时间,应控制在2小时以内尽快检测完。门诊尿液标本尽快检测,以减少尿液室温时间过长导致结晶析出,细菌产生。不管住院还是门诊尿液标本均应严格留取中段尿,以防UF-1000i尿沉渣分析仪出现细菌计数增高也可能引起尿液红细胞检测的假阳性。因此对于血尿性质判断过程中要注意尿液PH﹑渗透压﹑尿液放置时间等因素影响。

综上所述,UF-1000i 尿沉渣分析仪虽是目前测定尿液有形成分的先进仪器,但存在一定的假阳性或假阴性。目前尿液红细胞检测包括干化学分析法﹑沉渣分析法﹑显微镜镜检法三种方法。其中干化学分析法检测快速﹑简便,但是在检测红细胞方面受尿液维生素C含量影响而容易造成假阴性;人工显微镜镜检法素来被当作尿液有形成分的“金标准”,但该检测方法尿液需进行离心处理,费时且精度差,镜检结果容易受检验技师水平影响,从而势必导致无法满足临床大样本检测需求。因此我们认为三者应联合运用,相辅相成﹑互相弥补和互相印证。结合三种检验方法,使之组成为一套完整的整体化检测系统,有助于泌尿系统疾病诊断﹑治疗,提供更为准确可靠的依据。

[1] 宋尉,宋翠梅.UF-1000i 尿液分析仪和干化学分析仪与显微镜联合检测尿液红细胞的结果分析[J].国际检验医学杂志,2017,38(5):684-685.

[2] 袁松.不同方法检测尿液红细胞﹑白细胞的结果互认的可行性研究[D].南充:川北医学院,2014.

[3] 尹丽娟,常丽,胡海岩.尿沉渣分析仪红细胞假阳性结果分析[J].航空航天医学杂志,2015,26(2):143-144.

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[10] 宋尉,宋翠梅.UF-1000i 尿液分析仪和干化学分析仪与显微镜联合检测尿液红细胞的结果分析[J].国际检验医学杂志,2017,38(5):684-685.

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Application analysis of UF-1000i in detection of urine red blood cells

JI Fengqing TENG Jing LIN Liyun ZHANG Meixue CHEN Junying
Department of Clinical Laboratory, Xiamen Hospital of Traditional Chinese Medicine Affiliated Fujian University of Traditional Chinese Medicine, Xiamen 361009, China

Objective To analyze the factors of false positive and false negative of urine red cell detected by UF-1000i urinary sediment analyzer, and to put forward the corresponding solutions. Methods The urine samples of 518 outpatients and inpatients were detected by dry chemical analysis, microscope and UF-1000i analyzer, and urine red blood cell test data were collected. Red blood cell detection of true positive, true negative standard was determined by urine dry chemical method and microscopy. Results The positive rate of microscopy and UF-1000i urine analyzer were 36.49%, 40.15%, there was no significant difference between the two groups (P>0.05). The urine dry chemical method and the microscopic examination of red blood cells were positive for true positive standard. The false positive rate of UF-1000i analyzer was 3.67%. The urine dry chemical method and the microscopic examination of red blood cells were negative for true negative standard. The false negative rate of UF-1000i analyzer was 3.86%. The factors causing UF-1000i false positive were vaginal secretions, calcium oxalate crystals, bacteria and other salt crystallization, accounting for 42.10%, 21.05%, 10.53%, 26.32%,respectively. The cause of UF-1000i false negative was red cell lysis, or the instrument may be missed because of the decrease of fluorescence staining sensitivity.Conclusion This experiment shows that UF-1000i urine sediment analyzer must be combined with dry chemistry method and microscope to detect urine red blood cells,in order to improve the accuracy of the results.

UF-1000i urinary sediment analyzer; Microscopic examination; Red blood cell; False positive; False negative; Microscopic examination rule

R446.12

A < class="emphasis_bold"> [文章编号]]

] 2095-0616(2017)21-124-04

▲通讯作者

2017-09-14)

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