成伟伟，陈伯祥，杨 明，李 杰

（甘肃省畜牧兽医研究所，甘肃平凉 744000）

山羊痘病毒P32蛋白的原核表达及其免疫原性研究

成伟伟，陈伯祥，杨 明，李 杰

（甘肃省畜牧兽医研究所，甘肃平凉 744000）

为表达山羊痘病毒P32蛋白并研究其免疫原性，构建了含有P32基因的重组表达质粒pET-P32，诱导表达和纯化了P32蛋白；分别运用SDS-PAGE和Western blot，对该蛋白进行了分析和生物活性鉴定；用分析鉴定后的P32蛋白免疫BALB/c小鼠，然后采集小鼠血清，用间接ELISA进行抗体检测；用小鼠脾淋巴细胞增殖试验，检测该蛋白对机体的细胞免疫活性。结果显示：表达纯化的含有GST标签的P32重组蛋白，大小约39 kDa；Western blot显示 P32重组蛋白具有较好的特异性；间接ELISA抗体检测和小鼠脾淋巴细胞增殖试验表明P32重组蛋白具有良好的免疫原性。本试验结果为深入研究P32蛋白的生物学功能以及对山羊痘的诊断与防治奠定了基础。

山羊痘病毒；P32蛋白；免疫原性

山羊痘是由痘病毒科羊痘病毒属山羊痘病毒（Goatpox virus，GTPV）引起山羊及绵羊的一种急性、热性、高度接触性传染病[1]。该病以全身皮肤和黏膜部位出现典型痘疹为主要临床特征[2]，具有较高的发病率与死亡率，被世界动物卫生组织（OIE）列为必须报告的动物疫病，被我国列为一类动物疫病[3]。该病呈全球分布，流行广泛[4]，对养羊业造成严重危害和巨大经济损失。

GTPV为线性双股DNA病毒，基因组大小约为143～147 kb[5]。GTP 间的核心编码区和两端的反向末端重复序列（Inverted terminal repeat，ITR）构成。基因组中间核心区域（ORFs024-123）比较保守，主要调控病毒的复制、包装和释放；……