孟凤丽，张改平，刘运超，陈玉梅，王聚财，祁艳华，冉云伟，王爱萍

1.郑州大学 生命科学学院，河南 郑州 450001；2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002

人乳头瘤病毒31和33亚型L1基因导入水稻及转基因植株的鉴定

孟凤丽1，张改平2，刘运超2，陈玉梅1，王聚财2，祁艳华1，冉云伟1，王爱萍1

1.郑州大学 生命科学学院，河南 郑州 450001；2.河南省农业科学院 动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002

目的：结合水稻胚乳生物反应器的优点，将人乳头瘤病毒（HPV）31、33亚型的L1蛋白编码基因导入水稻，构建HPV31 L1、HPV33 L1植物表达载体，最终实现其在水稻胚乳表达系统中的表达。方法：利用生物信息学方法分析并优化合成HPV31及HPV33 L1蛋白编码基因，将其重组于中间载体pMP3和植物表达载体pCAMBIA1300中，分别构建植物双元表达载体pCAMBIA1300-pMP3-HPV-31 L1和pCAMBIA1300-pMP3-HPV-33 L1，采用遗传转化法经根癌农杆菌介导转化水稻TP309种子的愈伤组织，经共培养、潮霉素筛选和分化再生，获得潮霉素抗性植株。结果和结论：构建了HPV31 L1、HPV33 L1的植物表达载体，经根癌农杆菌介导转化水稻TP309种子的愈伤组织，获得转基因植株。

人乳头瘤病毒L1基因；根癌农杆菌；水稻胚乳表达系统；遗传转化；植物表达载体

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，在全球女性癌症死亡率中居第2位，仅次于乳腺癌[1-2]，全球每年约有50万新发病例，约20万死于宫颈癌。宫颈癌与生殖道人乳头瘤病毒（human papil⁃lomavirus，HPV）感染有密切关系，99.7％以上的宫颈癌病例伴有HPV感染[3]。HPV属于乳头瘤病毒科、乳头瘤空泡病毒A属，是一类双链小分子DNA病毒，直径45～55nm，衣壳呈二十面体立体对称，含72个衣壳亚单位，没有囊膜。……