焦龙 孙海东 陈超波 何川琦 王启晗 赵刚 韩天权 胡海 蒋兆彦

·论 著·(胆道外科专题)

PDZK1敲除对小鼠肝脏胆固醇代谢和胆囊结石形成影响的实验研究

焦龙 孙海东 陈超波 何川琦 王启晗 赵刚 韩天权 胡海 蒋兆彦

目的探讨敲除PDZK1(Postsynaptic density-95,disks-large,ZO-1-domain K1,PDZK1)基因对小鼠肝脏胆固醇代谢调节和胆囊结石形成的影响。方法雄性成年PDZK1基因敲除小鼠(PDZK1 knockout,KO组)和野生型小鼠(wild type,WT组)，每组各10只，以成石饲料分别喂养4周，观察胆囊成石情况，并收集肝脏和胆囊组织。采用蛋白印迹法测定肝脏PDZK1和清道夫受体B族1型(scavenger receptor B type 1,SRB1)表达。采用胆总管插管收集肝胆汁，测定胆汁分泌率和胆汁胆固醇含量。采用试剂盒酶法测定胆囊胆汁成分并计算胆汁胆固醇饱和指数(cholesterol saturation index,CSI)。以实时定量PCR检测肝脏脂质代谢相关基因的mRNA表达。结果成石饲料喂养4周后，WT组小鼠全部成石(10/10)，KO组小鼠则为40%(4/10)成石。两组小鼠肝胆汁分泌率差异无统计学意义，但KO组小鼠肝胆汁胆固醇含量显著降低(P<0.05)，胆汁酸含量增加(P<0.05)，且CSI降低(P<0.05)。KO组小鼠肝脏SRB1蛋白表达降低(P<0.05)，甾醇氧-酰基转移酶基因1/2 mRNA表达降低(P<0.05)，而肝型脂肪酸结合蛋白1和胆汁酸转运相关蛋白(ATP结合盒b11)表达则显著增加(P<0.05)。结论PDZK1影响SRB1在小鼠肝脏中表达，降低对高密度脂蛋白胆固醇摄取，减少胆汁胆固醇分泌，继而降低胆囊结石形成。

胆固醇结石； 肝脏； PDZK1； 清道夫受体B族1型

胆固醇结石病(胆石病)是一种常见病。在我国，其发病率逐年攀升。近期对上海地区的流行病学调查显示其发病率达到13%[1]。目前对于胆石病的有效治疗仍以手术为主。当前临床胆囊结石的类型主要为胆固醇结石，探索其发生的病理生理异常机制对于胆石病的防治具有重要意义。

从上世纪七八十年代以来的逐步研究显示，胆石病与胆汁胆固醇过饱和[2]继而胆固醇结晶形成并逐渐进展成结石有关。此外，胆汁成核异常[3]和胆囊收缩能力减弱[4]对于胆石形成具有促进作用。……