郜李彬 曹征宇 顾韵莉 周亚辉 （上海市浦东新区农业技术推广中心 201201）

玉露组培诱导不同部位外植体及不同培养基配方筛选初报

郜李彬 曹征宇 顾韵莉 周亚辉 （上海市浦东新区农业技术推广中心 201201）

为建立玉露无性繁殖系，满足其市场需求，进行了玉露组培诱导不同部位外植体及不同培养基配方筛选试验。结果表明，玉露幼嫩花茎的出菌率显著低于叶片，诱导成功率也明显高于叶片，建议采用玉露幼嫩花茎为外植体，最佳诱导培养基配方为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。

玉露；叶片；幼嫩花茎；培养基配方；诱导

玉露（Haworthia cooperivar.pilferaM.B. Bayer）为百合科十二卷属多肉植物中的软叶系品种，是名贵的室内观赏花卉，具有良好的市场前景。目前，玉露大多采用分株繁殖和种子繁殖，但存在繁殖系数低、扩繁速度慢等问题，而利用植物组织培养技术[1]，建立玉露组织培养与快速扩繁体系，对满足其市场需求具有重要的现实意义。笔者以玉露花茎和叶片等外植体为试验材料，进行了玉露组培诱导不同部位外植体及不同培养基配方筛选试验，以期建立其无性繁殖系，现将相关试验结果报道如下。

1 材料与方法

1.1 试验材料

玉露的叶片和幼嫩花茎。

1.2 试验方法

将选取的试验材料用流水冲洗2 h，在无菌操作台上用75%酒精浸泡15 s、无菌水清洗3遍，再用 0.1%升汞浸泡振荡10 min、无菌水冲洗4次，将消毒后的材料用无菌滤纸吸干水后置于盘中待用。在无菌操作台上，将消毒好的外植体切割分离，其中幼嫩花茎剪切成1 cm左右的小段、叶片切成1 cm×1 cm左右的小块，接种于诱导培养基中，每瓶接入1个外植体，每个培养基重复10次，放入无菌培养室中培养，培养温度为（20±2） ℃，光照强度为2 000 Lx，光照时间12 h/d。

诱导培养基配方分别为：（1）MS（CK）；（2）MS+BA 1.0 mg/L；（3）MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；（4）MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L；（5）MS+BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L；（6）MS+BA 2.0 mg/L；（7）MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；（8）MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L ；（9）MS+BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L；（10）MS+BA 5.0 mg/L；（11）MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；（12）MS+BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L；（13）MS+BA 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L；（14）MS+NAA 0.1 mg/L；（15）MS+NAA 0.5 mg/L；（16）MS+NAA 1.0 mg/L。培养基中均加入3%蔗糖和0.7%琼脂，调节pH 5.6～5.8。

1.3 观察项目

诱导期间，观察各处理外植体出菌情况。材料接入诱导培养基15 d后，每隔7 d切割转接1次，转接3次后观察外植体诱导情况。

2 结果与分析

2.1 外植体出菌情况

2种外植体、16个培养基配方、每个配方重复10次，每个外植体处理160瓶，经过30 d的诱导培养后，接种叶片的有87瓶出菌，出菌率高达54.38%；接种幼嫩花茎的有21瓶出菌，出菌率仅为13.13%。

2.2 外植体诱导分化情况

由表1可知，以玉露叶片为试验材料，仅有培养基配方（7）、（8）中零星出现叶片外植体膨大、形成少量愈伤组织且颜色不深的现象；培养基配方（1）、（2）、（3）、（4）、（5）、（6）、（10）中的叶片外植体均未出现膨大，绝大部分外植体均慢慢玻璃化，失去活性；培养基配方（9）、（11）、（12）、（13）、（14）、（15）和（16）中的叶片外植体尽管出现了不同程度的膨大，但均未出现愈伤组织。以玉露幼嫩花茎为试验材料，培养基配方（7）中的花茎经诱导培养，逐渐膨大，形成大量蓬松且颜色较深的愈伤组织，表现出相当的活性；培养基配方（3）、（4）、（8）出现花茎外植体膨大、形成少量愈伤组织且颜色不深的现象；其他培养基配方中的花茎外植体诱导均未获得成功。

表1 不同培养基配方对玉露外植体诱导分化情况比较

综上，以玉露叶片和幼嫩花茎为外植体进行诱导培养，均以培养基配方（7），MS+BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L的诱导效果为最好。

3 结论与讨论

试验结果表明，采用玉露不同部位为外植体，对外植体出菌率的影响较大，由于叶片生长时间较长，距离土壤较近，用相同消毒方法处理后，其出菌率是幼嫩花茎的4.14倍。用玉露不同部位为外植体，对外植体诱导的成功率影响较大，幼嫩花茎由于生长时间较短，组织活力较强，在多种配方的诱导培养基中均形成了愈伤组织；而叶片组织活力较弱，仅在配方（7）、（8）中出现了少量愈伤组织，且颜色不深。不同激素水平配比对玉露外植体诱导结果影响较大，在诱导发生过程中，在BA浓度为2.0 mg/L、NAA浓度为0.1 mg/L时，能诱导出大量蓬松且颜色较深的愈伤组织，诱导效果最佳；过高浓度的NAA（1.0 mg/L）和BA（5.0 mg/L）对玉露外植体的诱导反而起抑制作用，仅产生少量愈伤组织且颜色不深，诱导效果一般；未添加BA的培养基诱导不出愈伤组织。综上，建议采用玉露幼嫩花茎为外植体，最佳诱导培养基配方为MS+BA 2.0 mg/L +NAA 0.1 mg/L。

[1]谭文澄,戴策刚.观赏植物组织培养技术[M].北京:中国林业出版社,1991.

2016-12-15