张紫微，杨丽霞，吕晋琳，王先梅， 杨智华，陆霓虹

MiR-155对血管紧张素Ⅱ诱导小鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转换的影响及机制研究

张紫微，杨丽霞，吕晋琳，王先梅， 杨智华，陆霓虹

目的：观察miR-155对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导小鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）表型转换的影响并研究其可能的机制。

方法：原代培养小鼠VSMC，用不同浓度、时间AngⅡ作用于VSMC，然后用实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测不同处理组miR-155表达的变化情况。用qRT-PCR检测过表达及抑制表达miR-155后空白对照组、miR-155 mimics组、mimics阴性对照组、miR-155 inhibitors组、 inhibitors 阴性对照组的miR-155水平变化情况，检测转染效率。用免疫蛋白印迹（Western blot）法检测过表达及抑制表达miR-155后空白对照组、AngⅡ组、miR-155 mimics组、AngⅡ+miR-155 mimics组、miR-155 inhibitors组、AngⅡ+miR-155 inhibitors组对AngⅡ激活哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）及细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）通路的影响。Western blot检测转染miR-155、使用雷帕霉素、细胞外信号调节激酶1/2抑制剂（U0126）后空白对照、AngⅡ组、miR-155 mimics组、AngⅡ+miR-155 mimics组、AngⅡ+ U0126组、AngⅡ+雷帕霉组AngⅡ促进VSMC表型转换的影响，检测两个收缩表型蛋白标志物即平滑肌22α（SM22α）与α-平滑肌肌动蛋白（α-SM-actin），及一个合成表型蛋白标志物骨桥蛋白（OPN）。

结果：与作用0 h或0 mol/L AngⅡ相比，AngⅡ作用于VSMC后AngⅡ以浓度、时间依赖方式降低miR-155的表达。转染miR-155后可显著减少基础及AngⅡ促进mTOR与ERK1/2通路激活作用，而转染miR-155 抑制剂可进一步增加基础及AngⅡ促进mTOR与ERK1/2通路激活作用。雷帕霉素、U0126及转染miR-155均可抑制AngⅡ减少收缩表型蛋白标志物SM22α与α-SM-actin的表达，同时抑制AngⅡ促进合成表型蛋白标志物OPN的表达。

结论：AngⅡ通过抑制miR-155表达促进mTOR与ERK1/2激活促进VSMC表型转换。

核糖核酶类；血管紧张素Ⅱ；肌细胞，平滑肌

血管平滑肌细胞（VSMC）作为一种非终末分化细胞，其表型具有可调控性。……