崔 波， 宋彩霞， 王莹博， 王若斓， 蒋素华， 梁 芳， 叶永忠

(1.河南农业大学生命科学学院，河南 郑州450002； 2.郑州师范学院生物工程研究所，河南 郑州 450044； 3.郑州大学生命科学学院，河南 郑州 450001)

菊花几丁质酶基因ChCHI的克隆及表达分析

崔 波1,2， 宋彩霞1， 王莹博1， 王若斓2,3， 蒋素华2， 梁 芳2， 叶永忠1

(1.河南农业大学生命科学学院，河南 郑州450002； 2.郑州师范学院生物工程研究所，河南 郑州 450044； 3.郑州大学生命科学学院，河南 郑州 450001)

根据GenBank发布的几丁质酶基因的保守序列设计简并引物，采用RT-PCR和RACE技术，克隆到菊花1个几丁质酶基因ChCHI(GenBank登录号为KX881373)。ChCHI基因cDNA全长为1 385 bp，包含960 bp开放阅读框，编码319个氨基酸。ChCHI属于亲水性蛋白，相对分子质量约为35.5 kD，等电点为6.38，为稳定蛋白，二级结构预测表明该蛋白以α螺旋和无规则卷曲为主。蛋白序列比对和进化树分析表明，ChCHI基因编码的蛋白属于糖苷水解酶19家族几丁质酶，与薇甘菊(ACO25187.1)几丁质酶蛋白的亲缘关系最近，序列一致性为87%。qRT-PCR分析结果显示，SA处理可以明显提高贡菊叶片中ChCHI的表达量。菊花ChCHI在对抗环境胁迫的分子调控中起重要作用。

菊花；几丁质酶基因；克隆；表达分析

菊花(Chrysanthemummorifolium)为菊科(Compositae)多年生草本植物。菊花种类繁多、形态多样，是中国十大名花之一，也是世界四大切花之一，被广泛用于切花、盆栽以及园林绿化，栽培历史悠久。菊花富含黄酮类等多种生物活性物质，又具有药用和食用价值，在世界各地广为栽培。随着菊花的消费需求越来越大，为了满足市场的需求，温室栽培条件实现了菊花市场的全年供应。……