王语欣 杨冬琴 周静东 林江 姚东明 杨静 钱震 杨磊 钱军★

实时荧光定量PCR检测急性髓系白血病miR⁃125b的表达及临床应用

王语欣1杨冬琴1周静东1林江2姚东明2杨静1钱震1杨磊1钱军1★

目的采用实时荧光定量聚合酶链反应（real⁃time quantitative polymerase chain reaction，qPCR）法检测急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）中微小 RNA⁃125b（microRNA⁃125b，miR⁃125b）转录本含量，初步评价其在AML临床诊断中的意义。方法建立扩增miR⁃125b转录本的SYBR Green I染料法qPCR，对miR⁃125b转录本克隆质粒进行扩增，评价其在AML诊断中的特异性、重复性和灵敏性。并对69例AML患者的骨髓单个核细胞标本进行初步检测并评价其临床相关性。结果该方法能定量检测骨髓标本中miR⁃125b的表达水平，熔解曲线呈单峰，在108～103copies/μL范围内有良好的线性关系（R2=0.999）并且检测重复性良好。结果显示69例AML患者中miR⁃125b表达水平明显高于25例对照组，差异有显著统计学意义（P=0.001）。在初发AML的不同亚型中，M3型的miR⁃125b表达水平高于其他亚型，差异有统计学意义（P＜0.05）。miR⁃125b表达水平与非M3型AML患者的年龄、性别、外周血白细胞计数、血小板计数、血红蛋白含量、FAB分型、核型分组之间均无相关性（P＞0.05）。4例初诊AML患者在获得完全缓解后miR⁃125b表达水平均较治疗前有所降低。结论所建立的实时荧光定量PCR方法能敏感、特异地检测骨髓单个核细胞标本中miR⁃125b的表达水平，为进一步临床应用研究奠定了方法学基础。miR⁃125b异常高表达是AML中的一个常见分子事件，检测其表达可能有助于AML患者的辅助诊断和疾病状态监测。

实时荧光定量PCR；miR⁃125b；急性髓系白血病

急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia，AML）是起源于髓系祖细胞的一类造血系统恶性克隆性疾病。……