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(1.新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐 830052;2.新疆农业科学院农产品贮藏加工研究所,新疆乌鲁木齐 830091)

外源NO对伽师瓜AOX基因克隆表达及抗氰呼吸的影响

敬媛媛1,阿塔吾拉·铁木尔2,+,胡江伟2,魏佳2,张平2,吴斌2,*

(1.新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐 830052;2.新疆农业科学院农产品贮藏加工研究所,新疆乌鲁木齐 830091)

为了探究外源一氧化氮(nitric oxide,NO)熏蒸处理对伽师瓜(CucumismeloL.)采后贮藏过程中AOX基因表达及抗氰呼吸途径的影响,以伽师瓜为试材,采用外源60 μL/L NO熏蒸3 h,以不充入NO气体作为对照,在(5±0.5) ℃条件下贮藏49 d。根据甜瓜基因组数据库,通过EST设计引物,克隆获得伽师瓜AOX基因全长序列。得到的基因片段同其他物种的AOX基因具有高度的同源性,命名为CmAOX。通过拼接获得AOX基因的cDNA全长序列,基因cDNA全长为1300 bp,开放阅读框架为1042 bp,拟编码346个氨基酸,预测分子量为39606.6 Da,等电点为9.00。该基因已在GeneBank登录,登录号为:KM273124。通过荧光定量分析及抗氰呼吸速率的测定表明,经60 μL/L NO处理果实的CmAOX的表达量和抗氰呼吸速率明显高于对照果实。说明NO处理对伽师瓜采后贮藏过程中抗氰呼吸途径的影响可能与其调控AOX基因的表达密切相关。

伽师瓜,一氧化氮,抗氰呼吸,克隆,基因表达

高等植物线粒体电子传递链[1]主要有两条途径,一条是对氰化物敏感的细胞色素途径,另一条是抗氰呼吸途径(或称交替途径),对氰化物不敏感,是由线粒体内膜上的末端氧化酶AOX(交替氧化酶)所催化的。细胞色素呼吸途径产生的能量同ATP的合成偶联,而抗氰呼吸途径中电子由泛醌分支处直接传递给AOX,氧化生成水,不生成ATP,能量以热的形式释放[2]。……