孙 杰， 付立芳

(1山东医学高等专科学校中医学教研室， 2临沂市中医医院呼吸内科， 山东 临沂 276000)

Dickkopf-1沉默通过下调β-catenin水平抑制胃癌细胞侵袭及上皮-间充质转化*

孙 杰1△， 付立芳2

(1山东医学高等专科学校中医学教研室，2临沂市中医医院呼吸内科， 山东 临沂 276000)

目的： 探讨分泌蛋白Dickkopf-1 (DKK1)在人胃癌细胞中的表达及其对胃癌细胞侵袭能力的影响。方法: 以real-time PCR和Western blot法检测DKK1在人胃黏膜细胞(GES-1)和胃癌细胞(MKN-45和SGC-7901)中的表达水平；以RNA干扰法沉默DKK1，沉默效果以real-time PCR、Western blot及ELISA法验证；Transwell实验检测细胞侵袭能力，以丝裂霉素C抑制细胞增殖；real-time PCR及Western blot法检测细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)及β-连环蛋白(β-catenin)水平。结果: DKK1在MKN-45和SGC-7901细胞中的表达明显高于GES-1细胞，表明DKK1在胃癌细胞中表达显著升高；DKK1在MKN-45和SGC-7901细胞中被成功沉默后，细胞侵袭能力显著下降，并具有时间依赖性，同时伴随E-cadherin表达增高及N-cadhe-rin和vimentin表达下降，表明DKK1沉默能够显著抑制胃癌细胞侵袭和上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)；经外源性重组DKK1(rDKK1)转染肿瘤细胞后，进一步证实DKK1具有促胃癌细胞侵袭的作用，并可促进EMT进程；DKK1沉默通过下调β-catenin水平来实现其对胃癌细胞侵袭及EMT的抑制作用。结论: DKK1在人胃癌细胞中表达显著增高，且DKK1沉默能够通过下调β-catenin水平抑制胃癌细胞侵袭及EMT过程。

Dickkopf-1； 胃癌； 上皮-间充质转化； 细胞侵袭； β-连环蛋白

胃癌是全球最常见的消化道恶性肿瘤之一，具有较高的发病率和死亡率[1-2]。基于胃癌早期低诊断率的特点，越来越多的研究致力于寻找胃癌特异性血清肿瘤标志分子[3]。Dickkopf (DKK)是一组分泌型糖蛋白，通常由225～350个氨基酸残基组成，能够负性调控Wnt信号通路下游基因活性从而发挥促癌或抑癌作用[4-5]。……