郭 玲， 盛华均， 刘 茜， 杨清华， 朱淑娟

(重庆医科大学基础医学院人体解剖教研室， 重庆 400016)

格列本脲对胶质母细胞瘤活性及细胞内酸碱平衡的影响*

郭 玲， 盛华均， 刘 茜， 杨清华， 朱淑娟△

(重庆医科大学基础医学院人体解剖教研室， 重庆 400016)

目的： 探讨格列本脲对胶质母细胞瘤活性及细胞内酸碱变化的影响。方法: 使用不同浓度的格列本脲(Glib)处理人胶质瘤细胞株U251和U87，通过CCK-8法筛选有效剂量；随后将实验分成对照组和药物处理组，划痕实验检测细胞迁移情况，细胞pH指示荧光探针检测细胞内pH变化，Western blot测定内向整流钾离子通道4.1(Kir4.1)和单羧酸转运蛋白1(MCT1)的表达情况。结果: CCK-8法检测结果显示，Glib作用于U251细胞和 U87细胞48 h的半数抑制浓度(IC50)分别为400.20 μmol/L和553.70 μmol/L，且在100～1 600 μmol/L的浓度区间范围内，Glib抑制U251细胞活力，在50～1 600 μmol/L的浓度区间范围内，Glib抑制U87细胞活力，两者均呈浓度依赖性(P<0.05)；与对照组相比较，Glib不仅能够抑制细胞迁移(P<0.05)，抑制作用与药物浓度呈正相关(P<0.05)，而且使实验组细胞内荧光强度减弱(P<0.05)，提示随着药物浓度的增高，细胞内pH值逐渐下降(P<0.05)；实验组细胞的Kir4.1和MCT1蛋白含量明显降低，均有浓度依赖性(P<0.05)。结论: Glib在一定剂量范围内通过下调Kir4.1和MCT1表达诱导细胞内环境酸化，抑制胶质瘤细胞生长。

格列本脲； 胶质母细胞瘤； 细胞活性

胶质瘤是中枢神经系统最常见的颅内原发肿瘤[1]，发生发展机制至今仍不完全清楚。世界卫生组织根据其病理特点将其划分为4个病理级别，即Ⅰ～Ⅳ级，其中Ⅰ～Ⅱ级属低级别，Ⅲ～Ⅳ级属高级别，也是恶性胶质瘤[2]。恶性胶质瘤其侵袭性强、术后复发率高，目前治疗效果不理想[3-4]。因此，探寻其机制及其防治迫在眉睫。

细胞内碱化与细胞增殖密切相关。研究表明内向整流钾离子通道4.1(inwardly-rectifying potassium channel 4.1，Kir4.1)和单羧酸转运蛋白(monocarbo-xylate transport proteins，MCT)的亚型MCT1均高表达于脑胶质瘤中，参与调节细胞增殖生长[5-10]。Kir4.1对K+具有强大的内向整流作用[11-12]，MCT1主要参与乳酸及单羧酸的跨膜运输[10]，二者均在维持胞内外酸碱平衡的过程中发挥重要作用[12]。……