樊佳新，王 帅,2,3，孟宪生,2,3，包永睿,2,3，李天娇,2,3

(1.辽宁中医药大学药学院，2.辽宁省组分中药工程技术研究中心 116600；3.辽宁省现代中药研究工程实验室，辽宁 大连 116600)

基于微流控芯片技术橙皮苷抗肺肿瘤作用机制研究

樊佳新1，王 帅1,2,3，孟宪生1,2,3，包永睿1,2,3，李天娇1,2,3

(1.辽宁中医药大学药学院，2.辽宁省组分中药工程技术研究中心 116600；3.辽宁省现代中药研究工程实验室，辽宁 大连 116600)

目的探究橙皮苷诱导人肺癌细胞A549凋亡的作用机制。方法基于微流控芯片技术采用Hoechst 33342/PI染色法检测橙皮苷对肺癌细胞A549凋亡坏死的影响；流式细胞术检测橙皮苷对肺癌细胞周期及凋亡的影响；实时荧光定量PCR技术检测相关基因VEGF、PI3K及PTEN的表达；Western blot 技术检测橙皮苷诱导肺癌细胞中PI3K-Akt信号通路相关蛋白PI3K、Akt、PTEN及凋亡蛋白Bcl-2、周期蛋白Cyclin B1的表达。结果橙皮苷作用于细胞G0/G1期及S期，阻滞细胞分裂，并呈现浓度依赖性诱导肺癌细胞凋亡，其细胞凋亡坏死率由正常对照组的(6.7±0.6)%增至(27.9±1.1)%；经橙皮苷诱导后的肺癌细胞中VEGF和PI3K基因表达相对降低，抑癌基因PTEN表达相对增加。Western blot 结果显示，经橙皮苷诱导的肺癌细胞中凋亡蛋白Bcl-2及周期蛋白Cyclin B1相对表达降低，PI3K-Akt信号通路蛋白Akt表达量与对照组比较明显减少，PI3K蛋白表达量相对增加，PTEN表达量无明显变化。结论橙皮苷可能是通过干扰PI3K-Akt信号通路，阻碍肿瘤细胞的分裂并促进凋亡蛋白的产生，从而诱导肺癌细胞 A549 凋亡。

橙皮苷；肺癌细胞A549；微流控芯片；实时荧光定量PCR；PI3K-Akt信号通路；Cyclin B1；Bcl-2；细胞凋亡

癌症一直是危害人类健康的历史性难题，其中肺癌已逐渐成为三大癌症之一。……