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提高“DNA粗提与鉴定”实验开出率的思考与探索

2017-08-20霍静

生物学教学 2017年2期
关键词:实验

霍 静

(西南大学生命科学学院/西南大学科学教育研究中心 重庆 400715)

李妞妞 曾令江

(西南大学生命科学学院 重庆 400715)

20世纪中后叶,分子生物学开发了一套人工操作DNA的技术,揭开了基因工程的序幕。目前,提取DNA已经有了较为成熟的方法,常用的有CTAB法、SDS法、盐析法等[1],甚至用一些特殊的方法还能获得标本中“痕量级”DNA。中学学习DNA的提取,旨在结合学生已有知识,学会实验研究的思路和方法。人教版教材就是利用“渗透吸水”和“盐析”的原理,引导学生理解DNA提取的实验设计。为了便于中学开出更具有操作性的DNA提取和鉴定的实验,本文尝试解析DNA粗提的实验原理,并对实验方法进一步改进,寻找一个适合在一节课中完成的实验方案,为在中学更好地开设出该实验提供理论和方法的指导。

1 实验原理的解析

1.1 提取液的基本成分 从活细胞中获取DNA,需要先构建一个细胞的立体图景,才能更好的确定出实验的基本思路,理解提取液的基本成分。细胞中的DNA大部分稳定地存在细胞核中,线粒体和叶绿体中也有少量的DNA存在,细胞核和细胞器悬浮于细胞质基质中,细胞质基质是一个酶溶液,各种复杂的代谢反应在这里有条不紊的进行。

1.1.1 缓冲体系的建立 目前研究已发现细胞质基质是一个高度有序的体系,其中蛋白质与蛋白质之间,蛋白质与其他大分子之间通过弱键而相互作用,并处于动态平衡之中,一旦细胞破裂,依靠分子间脆弱的相互作用而形成的结构体系就会遭到破坏。……

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