安红强， 王万军

(西南交通大学 生命科学与工程学院， 成都 610031)

铁皮石斛胚胎发生相关基因DoEMB8的克隆及表达分析

安红强， 王万军

(西南交通大学 生命科学与工程学院， 成都 610031)

采用RACE和巢式PCR技术克隆出铁皮石斛胚胎发生相关基因DoEMB8(Embryogenesis-associated protein EMB8)序列。序列分析表明该基因全长2077 bp，包含一个1824 bp的CDS，编码608个氨基酸残基。分子进化分析显示，DoEMB8与海枣(Phoenixdactylifera)、油棕(Elaeisguineensis)、小果野芭蕉(Musaacuminatasubsp.malaccensis)等单子叶植物的亲缘关系较近。跨膜区分析显示DoEMB8蛋白含有两个跨膜螺旋结构，亚细胞定位显示该基因可能存在于线粒体。RT-qPCR分析表明，DoEMB8在原球茎不同发育时期表达量较为恒定，在PLB(Protocorm like body)中的表达量较原球茎不同时期要高，在组织表达分析中，种子中的表达量最高，较根中的表达量上升了3.16倍，表明该基因在胚胎发育时期有着持续稳定且较高的表达，可能对植物胚胎发育起着重要作用。

铁皮石斛； 胚胎发育相关基因； RACE； RT-qPCR

在大多数绿色植物中，胚胎发生在植物的生命周期中扮演着重要作用[1-2]。植物的胚胎发生是指从单细胞的受精卵到多细胞种胚的发育分化过程，胚胎形成包含两个明显的阶段：早期形态学事件和后期生殖细胞的形成[3-4]。在植物胚胎发育过程中，成熟的植株都会经过一个基本的形体发育过程，这包括芽、根端分生组织、子叶、幼根和子叶下胚轴的形成，之后，植物基底端轴线、径向元素、表皮、基本组织和维管结构会随之形成；这些要素在植物胚胎发育的早期形成，并在植物整个生命周期中稳定存在[5-9]。……