张斌

“小三阳”患者血清HBV-LP检测的临床应用价值

张斌

目的 检测HBV-LP在“小三阳”患者中的表达，并探讨其意义。方法 利用ELISA法检测300例乙肝“小三阳”患者血清中HBV-LP水平；实时荧光定量PCR检测HBV-DNA，并对两者检测结果作相关性分析。结果 HBV-LP及HBV-DNA在300例患者中的总阳性率（36．3%、41．7%）、在172例肝功能正常患者中的阳性率（12．2%、14．5%）及在128例肝功能异常患者中的阳性率（68．8%、78．1%）间比较，P＞0．05。结论 在无条件开展PCR检测的基层医院，可以开展HBV-LP检测作为判断乙肝“小三阳”患者的病毒复制指标。

乙肝；小三阳；HBV-LP；HBV-DNA

乙型肝炎“小三阳”见于非活动性HBsAg携带者和HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者，出现的原因比较复杂。临床上常通过E抗原和DNA检测结果，判断患者体内乙肝病毒在体内存在和复制情况，判断其传染性，并作为治疗的指标，但由于技术条件和硬件要求的限制，PCR不太适合在基层医院和社区卫生服务中心开展，难以及时为基层临床医生提供相关信息[1]。本研究利用ELISA法检测300例乙肝“小三阳”患者血清中HBV-LP水平；实时荧光定量PCR检测HBV-DNA，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本来源收集300例2015年6月—2016年12月在我院门诊就诊和住院的经ELISA法检测呈表面抗原、E抗体、核心抗体阳性，表面抗体、e抗原阴性的“小三阳”乙肝病毒携带者血清标本，每例标本分为两份，置于-20℃冰箱保存，分批进行实验，1份标本送南京迪安医学检验中心进行实时荧光定量PCR检测HBV-DNA。一份血清标本留我院作HBV-LP检测。300例标本中肝功能正常者172例，肝功能异常者128例；男性188例，女性112例，年龄18～75岁，平均（49.5±8.4）岁。

1.2 实验方法

（1）HBV-LP检测：采用ELISA法，试剂盒由英科新创（厦门）科技有限公司提供，结果采用MODEL-680酶标仪判读。操作严格按试剂盒操作说明进行。

（2）HBV-DNA检测：采用实时荧光定量PCR法，标本采集后，送到南京迪安医学检验中心进行检测，结果判定：copies＞1×103为阳性。

1.3 统计学方法

采用Stata8.0软件进行统计学分析，率的比较采用χ2检验；HBV-LP及HBV-DNA间相关分析采用Spearman等级相关，检验水准α均为0.05，P＜0.05，差异有统计学意义。

2 结果

2.1 300例“小三阳”血清标本HBV-LP和HBV-DNA检测结果

ELISA法检测HBV-LP总阳性率为36.3%（109/300），实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA总阳性率为41.7%（125/300），总阳性率间两组对比，差异无统计学意义（χ2=1.793 5，P=0.181）（表1）。

表1 300例“小三阳”血清标本HBV-LP和HBV-DNA检测结果

2.2 乙肝病毒携带者HBV-LP及HBV-DNA检测阳性率

172 例肝功能正常的“小三阳”乙肝病毒携带者HBV-LP及HBV-DNA检测阳性率分别为12.2%（21/172）及14.5%（25/172），（χ2=0.401 5，P=0.526）；128例肝功能异常的“小三阳”乙肝病毒携带者HBV-LP及HBV-DNA检测阳性率分别为68.8%（88/128）及78.1%（100/128），两者差异无统计学意义（χ2=2.883 6，P=0.089 ）

3 讨论

由于PCR检测法的高灵敏性和特异性，HBV-DNA检测结果是临床上用来评估抗病毒疗效的重要指标之一，但受实验条件及实验人员的限制，在基层医院开展有一定的困难[2-3]。不少研究显示HBV-LP与血清HBV-DNA检测结果有良好的一致性，HBVLP是从蛋白水平反映HBV感染者体内病毒复制程度的可靠指标，尤其是HBeAg阴性患者体内病毒复制及预后判断的良好血清学监测指标，且其检测方法为常规的ELISA法，适合在基层医院开展运用[4-6]。

本研究结果显示虽然HBV-LP总阳性率（36.3%）、在172例肝功能正常患者中的阳性率（12.2%）及在128例肝功能异常患者中的阳性率（68.8%）均略低于HBV-DNA检测结果（41.7%、14.5%、78.1%），但差异均无统计学意义，且HBV-LP及HBV-DNA检测结果间具有高度相关性，表明HBV-LP在定性检测方面，可在一定程度上替代HBV-DNA。但因其不能完全客观反映病毒量的变化，临床应用仍然有其局限性[7]。目前有专家提倡，HBV-DNA阴转、e抗原血清转换已不能作为治疗的终点，而是考虑HBsAg的阴转作为治疗的终点[8]。因此，探讨HBV-LP作为临床乙肝患者抗病毒治疗监测指标之一是有一定理论依据的，不论是检测方法还是临床应用上，HBV-LP都有它的优越性，采用酶联免疫法检测乙型肝炎病毒外膜大蛋白，可以反映乙型肝炎病毒复制活跃程度，作为病毒感染后诊断、治疗及预后判断的重要监测指标，而且酶联免疫法检测方法成熟，操作简单，对设备要求不高，在广大基层医院便于开展。尤其在基层医院和社区卫生服务中心，HBV-LP的检测是判断乙肝患者和乙肝病毒携带者有无传染性最重要、最有效的指标之一。

[1]乐爱平，鞠北华，王文，等． 乙肝病毒大蛋白检测在乙型肝炎诊治中的临床意义[J]．世界华人消化杂志，2006，14（16）：1578-1581．

[2]中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病学分会．慢性乙型肝炎防治指南（2010年版）[J]． 中华实验和临床感染病杂志，2011，19（1）：13-24．

[3]杨延敏，王洪笑，王桂利，等．乙肝表面抗原大蛋白与HBV DNA的比较及其与ALT的关系[J]．世界华人消化杂志，2006，14（27）：2733-2736．

[4]莫喜明，许允，董存岩，等．乙肝病毒外膜大蛋白检测在病毒复制判定中的意义[J]．中国实验诊断学，2009，13（11）：1591-1593．

[5]史兵伟，田晓静，虞丽娟，等．术前筛查HBeAg阴性HBV感染者检测乙肝大蛋白的意义[J]．海南医学，2013，24（16）：2412-2414．

[6]周萍，郭炫，陈葳，等．乙肝患者HBV-LP与HBV-DNA表达的相关性及临床应用评价[J]．临床和实验医学杂志，2013，12（19）：1524-1525，1528．

[7]蔡叶琴，孙彦，黄黎．血清HBV-DNA与HBV免疫学标志物的相关性研究[J]．河北医学，2011，17（2）：153-155．

[8]朱锦宏，吴晓蔓．乙肝患者血清HBV cccDNA的临床意义[J]．实用医学杂志，2013，29（3）：395-397．

Clinical Value of Serum HBV-LP Detection in Patients With “Small Three Positive”

ZHANG Bin Laboratory Department, The Eighth People's Hospital of Tongzhou District, Nantong Jiangsu 226361, China

ObjectiveTo detect the expression of HBV-LP in patients with“small three positive” and explore its significance.MethodsThe serum levels of HBV-LP in 300 patients with hepatitis B and “small three positive” wre detected by ELISA; Real time quantitative PCR was used to detect HBV-DNA, and the correlation between the two assays was analyzed.ResultsHBV-LP and HBV-DNA in 300 patients, the total positive rate (36.3%, 41.7%), the positive rate in patients with normal liver function in 172 cases (12.2%, 14.5%) and the positive rate in patients with abnormal liver function in 128 cases (68.8%, 78.1%) and the comparison between theP＞0.05.ConclusionIn the primary hospital where PCR testing is carried out without qualifcation, HBV-LP test can be used as a virus replication index for hepatitis B patients.

hepatitis B; small three positive; HBV-LP; HBV-DNA

R446

A

1674-9308（2017）16-0059-02

10．3969/j．issn．1674-9308．2017．16．029

南通市通州区第八人民医院检验科，江苏 南通 226361