尚攀 付元帅 施志仪 喻杰 刘素萍

（上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海 201306）

甲状腺激素受体与Drosha蛋白互作鉴定分析

尚攀 付元帅 施志仪 喻杰 刘素萍

（上海海洋大学农业部淡水水产种质资源重点实验室，上海 201306）

为了证明甲状腺激素受体（THR）与Drosha蛋白之间的相互作用，以HEK293细胞为材料，利用免疫共沉淀的方法获得蛋白免疫复合物，再经Western blot检测和质谱分析。结果表明，用THR抗体Western blot检测出有THR蛋白的存在，反之Drosha抗体Western blot检测有Drosha蛋白的存在；同时，THR抗体免疫沉淀后的质谱鉴定存在Drosha蛋白，Drosha抗体免疫沉淀后的质谱鉴定也存在THR蛋白，由此说明甲状腺激素受体与Drosha蛋白之间确实存在相互作用。并且，初步筛选出与两者共同作用的54个蛋白，经Go 聚类分析揭示鉴定蛋白主要是细胞膜和细胞核中成分，参与细胞迁移、细胞凋亡、蛋白代谢、免疫应答、信号通路调节及转录调控等生物途径，具有核酸结合、细胞骨架结合等分子功能。

甲状腺激素受体；Drosha蛋白；免疫共沉淀；质谱分析；HEK293细胞

甲状腺激素（Thyrodi hormone，TH）对生物生长、分化、发育和保持代谢平衡具有十分重要的作用［1-3］。TH的生理作用主要是通过甲状腺激素受体（Thyrodi hormone receptor，THR）进行［4］。冯绮文等［5］表明甲状腺激素受体（THR）是一种重要的核受体超家族的成员，THR分子可分成6个区，从氨基端到羧基端依次为A-F区，它们组成3个功能域。其中A区和B区合称为A/B区，组成转录激活域，其内参与转录激活作用的区域称为AF1区；C区形成DNA结合域（DBD），E区形成配体结合（LBD），而F区的功能则不很清楚［6，7］。……