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牦牛KLF3基因克隆及组织表达分析

2017-08-07林森林亚秋朱江江柏雪江明锋王永

生物技术通报 2017年8期
关键词:分析

林森林亚秋朱江江柏雪江明锋王永

(1. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,成都 610041)

牦牛KLF3基因克隆及组织表达分析

林森1,2林亚秋1朱江江2柏雪1江明锋1王永1,2

(1. 西南民族大学生命科学与技术学院,成都 610041;2. 青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室,成都 610041)

旨在克隆牦牛KLF3基因序列,并获得其生物学特征,同时阐明其组织表达规律。选取4-6周岁的健康麦洼牦牛6头,采集脾、肺、肾、皮下脂肪和背最长肌组织样品,提取组织总RNA,利用RT-PCR方法克隆KLF3基因序列,同时利用荧光定量PCR(qPCR)技术检测该基因在不同组织中的表达情况。结果表明,获得牦牛KLF3基因序列1 137 bp(GenBank登录号:KX964630),其中CDS为1 041 bp,5′UTR 32 bp和3′UTR 64 bp,编码346个氨基酸,牦牛KLF3氨基酸序列与普通牛(XP_010820342.1)的氨基酸序列同源性达100%。KLF3 mRNA在牦牛肺脏和肝脏的表达水平较高,极显著高于其他组织(P<0.01)。

牦牛;KLF3基因;克隆;组织表达

Krüppel样转录因子(Krüppel-like factors,KLF)是一类转录调节蛋白,其广泛参与细胞增殖、分化、凋亡以及胚胎发育等一系列生理过程的调控。目前,哺乳动物KLFs家族已有17个成员被确认,分别是KLF1-KLF17[1,2]。KLF3作为KLFs家族重要成员之一,因其在N端具有较多的碱性氨基酸,又被称为碱性KLF因子(Basic krüppel-like factor,BKLF),目前已证实KLF3在脂肪生成[3]、B细胞发育[4]、红细胞生成[5]和心肌细胞分化[6]等过程中发挥重要调控作用。

研究发现KLF3基因敲除小鼠相对于正常小鼠具有较少的白色脂肪组织,且脂肪垫的细胞数量更少,体积更小[3]。3T3-L1前体脂肪细胞系研究显示,脂肪细胞分……

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