辜洪娇， 陈晓华， 孔田玉， 胡 欢， 刘宁宁， 熊旭明， 张振辉△

(广州医科大学附属第二医院1重症医学科，2心血管疾病研究所， 广东 广州 510260)

去泛素化酶USP14调控H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤*

辜洪娇1， 陈晓华1， 孔田玉1， 胡 欢1， 刘宁宁2， 熊旭明1， 张振辉1△

(广州医科大学附属第二医院1重症医学科，2心血管疾病研究所， 广东 广州 510260)

目的： 观察抑制泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin-specific protease 14，USP14)的活性对H2O2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的影响。方法: 体外培养 H9c2 心肌细胞，用H2O2(25 μmol/L)处理2 h，建立心肌细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为对照(control，CON)组、模型组(H2O2组)、USP14抑制剂IU1处理组(IU1组)和IU1处理后建模组(IU1+H2O2组)。MTS法检测 H9c2心肌细胞活力；流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的产生和细胞存活率；Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶家族相关蛋白的表达变化。结果: 与CON组相比，H2O2组细胞活力、细胞存活率显著降低，细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38的蛋白水平显著增加(P<0.05)；与H2O2组比较，IU1+H2O2组细胞活力、细胞存活率显著增加，细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论: 抑制USP14活性可以减轻氧化应激条件下H9c2 心肌细胞的损伤，其机制可能与抑制丝裂原活化蛋白激酶信号活化和下调凋亡相关蛋白有关。

泛素特异性蛋白酶14； IU1； 氧化应激； 细胞凋亡； 丝裂原活化蛋白激酶

心肌急性缺血、缺氧、再灌注等异常可导致心肌的急性损伤，从而引起许多心血管疾病如充血性心力衰竭、心肌梗死、心肌病等的发生，其中活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)介导的氧化应激损伤是这些疾病发生过程中重要的参与者[1]。体内ROS增多可诱导心肌细胞坏死或者凋亡，因此，如何减轻心肌细胞在氧化应激中的急性损害一直是当前研究者关注的重点之一。

去泛素化酶(deubiquitinating enzyme，DUB)作为泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system，UPS)的重要组成成分，可调节靶蛋白泛素化进程，参与肿瘤与癌症[2]、代谢与应激[3]、感染与免疫[4]、干细胞与发育调控[5]等体内相关病理生理过程。……