张红萍， 袁 梅

(嘉兴市中医院检验科， 浙江 嘉兴 314001)

白藜芦醇通过促进Apaf-1/caspase-9复合物的形成增强5-氟尿嘧啶对骨肉瘤CD133+细胞亚群凋亡的诱导

张红萍△， 袁 梅

(嘉兴市中医院检验科， 浙江 嘉兴 314001)

目的： 探讨白藜芦醇联合化疗药物5-氟尿嘧啶对骨肉瘤CD133+细胞亚群的协同杀伤效应及机制。方法: 将人骨肉瘤细胞系MG-63 CD133+细胞亚群及相应CD133-细胞亚群用5-氟尿嘧啶及白藜芦醇进行体外处理。MG-63细胞的相对细胞活力用MTT法进行检测；细胞凋亡率用流式细胞术进行检测；用Western blot实验检测caspase-9和caspase-3的活化、Apaf-1的表达水平及细胞色素C的释放；用免疫共沉淀法检测Apaf-1与caspase-9前体的相互作用。结果: 5-氟尿嘧啶对MG-63 CD133+细胞亚群的杀伤活性和凋亡诱导活性均显著低于MG-63 CD133-细胞亚群。但联用白藜芦醇能显著提高5-氟尿嘧啶对MG-63 CD133+细胞亚群的细胞活力抑制率。白藜芦醇处理能显著上调MG-63 CD133+细胞亚群中Apaf-1的表达水平，在MG-63 CD133+细胞亚群中转染Apaf-1 siRNA后，5-氟尿嘧啶联用白藜芦醇的协同效应受到显著抑制。另外，免疫共沉淀实验结果表明白藜芦醇联合5-氟尿嘧啶能显著诱导MG-63 CD133+细胞亚群中Apaf-1/caspase-9复合物的形成，从而诱导caspase-9发生活化。结论: 白藜芦醇通过促进Apaf-1/caspase-9复合物的形成,增强5-氟尿嘧啶对骨肉瘤CD133+细胞亚群凋亡的诱导。

白藜芦醇; 5-氟尿嘧啶; 骨肉瘤; CD133+细胞亚群; Apaf-1; Caspase-9

骨肉瘤是一种好发于儿童和青少年的原发性恶性骨肿瘤[1]。在骨肉瘤的治疗中，化疗是一种不可替代的行之有效的治疗方法。然而在化疗过程中，肿瘤细胞会逐渐产生耐药性，从而大大限制了化疗的临床应用[2]。……