易 蓓， 袁海汀， 许永会， 罗 綦， 曾沉思， 陈建斌

(重庆医科大学附属第一医院血液科，重庆 400016)

NF-κB抑制剂PDTC对人骨髓瘤U266细胞增殖和凋亡的影响*

易 蓓， 袁海汀， 许永会， 罗 綦， 曾沉思， 陈建斌△

(重庆医科大学附属第一医院血液科，重庆 400016)

目的： 探讨NF-κB特异性抑制剂PDTC对多发性骨髓瘤U266细胞增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法: 采用不同浓度PDTC (25、50、100和200 μmol/L)处理U266细胞，CCK-8法和活细胞计数检测U266细胞的增殖活性；流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期；RT-qPCR及Western blot检测PDTC处理前后DNA甲基转移酶1(DNMT1) mRNA和蛋白的表达；Western blot检测NF-κB (P65)、DNMT1、Bcl-2、cyclin D1、cleaved caspase-3和cleaved caspase-8的蛋白水平。结果: PDTC处理U266细胞48 h后，NF-κB (P65)的蛋白水平被抑制；PDTC抑制U266细胞增殖，作用呈浓度及时间依赖性；PDTC作用48 h后，与对照组比较，细胞凋亡率呈浓度依赖性增高(P<0.05)，细胞被阻滞在G2期；DNMT1的mRNA及蛋白水平均降低；Western blot结果显示PDTC可通过抑制NF-κB下调Bcl-2的表达，使cyclin D1、cleaved caspase-3和cleaved caspase-8蛋白水平增加。结论: PDTC抑制NF-κB信号通路，通过诱导U266细胞凋亡从而抑制细胞增殖，其机制可能与抑制DNMT1的表达、阻滞细胞周期和启动凋亡途径有关。

NF-κB； PDTC； 多发性骨髓瘤； 细胞凋亡； DNA甲基转移酶1

多发性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是浆细胞异常增殖的恶性肿瘤，约占血液系统恶性肿瘤的13%，全世界每年大约86 000的新增病例[1]。近年由于新型药物的应用及造血干细胞移植技术的发展使得该病得到极大缓解，但复发和耐药问题仍未得到有效解决[2]，积极寻求新的药物及治疗手段仍是一项重大课题。

NF-κB是一类重要的核转录因子，可以调控多种基因从而发挥多种生物学功能，包括调节细胞凋亡、参与炎症反应过程、调控细胞周期、参与肿瘤的发生及耐药等[3]。研究显示，NF-κB与血液系统肿瘤密切相关，在髄系白血病、淋巴细胞白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤中均有高活性[4-7]。吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate，PDTC)是一种金属螯合物，分子量为164.29 kD，具有抗氧化作用，是NF-κB信号通路特异性抑制剂。……