赵 克， 刘康栋

(郑州大学附属肿瘤医院神经外科， 河南 郑州 450008)

MicroRNA-483-3p对人神经胶质瘤细胞的作用*

赵 克， 刘康栋△

(郑州大学附属肿瘤医院神经外科， 河南 郑州 450008)

目的： 探讨microRNA (miRNA)-483-3p对人神经胶质瘤细胞A172生长和迁移能力的影响及潜在作用机制。方法: 实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测人肾胚细胞系HEK-293和不同神经胶质瘤细胞株(A172、U251和SHG44)中miRNA-483-3p的表达水平。转染miRNA-483-3p抑制序列(miRNA-483-3p inhibitor)下调A172细胞中miRNA-483-3p的表达，采用CCK-8法和流式细胞术检测细胞活力和周期分布；Transwell实验检测细胞的迁移；Western blot检测周期相关调控因子及上皮-间充质转化相关蛋白的水平。双萤光素酶报告基因分析法预测及验证其可能的靶基因。结果: miRNA-483-3p在各型神经胶质瘤细胞中高表达。沉默miRNA-483-3p后，A172细胞的活力下降并呈现出明显的周期阻滞，且细胞迁移率也显著降低。同时细胞中cyclin D1、周期蛋白依赖性激酶4、磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白、N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平均显著降低，E-cadherin和β-catenin的蛋白表达水平显著升高。双萤光素酶报告基因分析显示Smad4是miRNA-483-3p的可能作用靶点，A172细胞共转染miRNA-483-3p inhibitor和Smad4 siRNA可部分逆转miRNA-483-3p介导的细胞增殖及迁移抑制。结论: 沉默miRNA-483-3p可通过靶向Smad4抑制神经胶质瘤细胞株A172的生长及迁移。

MicroRNA-483-3p; 神经胶质瘤; 细胞活力; 细胞迁移; Smad4

神经胶质瘤是中枢神经系统的常见恶性肿瘤，也是颅脑肿瘤死亡的主要原因之一，且复发率高，预后差，严重危害着人们的身体健康[1-2]。肿瘤细胞的恶性生物学特性则是导致胶质瘤治疗困难的根本原因，其中基因遗传学的改变，对深入研究胶质瘤发病机制与其恶性表型关系具有重要的意义，特别是对基因具有调控能力的微小RNA(microRNA，mi-RNA)。……