刘 秦 方勇涛 陈 源 陈晓云

(广州医科大学附属第一医院神经内科，广东 广州 510000)

抗Aβ42单链抗体对阿尔茨海默病小鼠脑中淀粉样沉积的改善作用

刘 秦 方勇涛1陈 源2陈晓云3

(广州医科大学附属第一医院神经内科，广东 广州 510000)

目的 探讨以β淀粉样蛋白(Aβ)42为靶抗原筛选人源天然单链抗体(scFv)噬菌体抗体库中的特异性抗体对阿尔茨海默病(AD)模型鼠中淀粉样沉积的影响。方法 以Aβ42抗原包被免疫管，对人源天然scFv噬菌体抗体库进行筛选，经过3轮吸附-洗脱-扩增淘选富集，制备单克隆噬菌体抗体颗粒，用酶联免疫吸附(ELISA)法检测scFv的结合活性，得到一株阳性克隆scFv23。采用Western印迹和免疫组化的方法检测了scFv23与Aβ42单体、寡聚体、纤维和鼠脑中Aβ沉积的结合能力。并通过甲氮甲唑蓝(MTT)法检测scFv23对Aβ42寡聚体引起细胞毒性的影响，同时采用硫黄素-T荧光法(ThT-F)测定scFv23对Aβ42聚集形成纤维的影响。最后，通过体内实验检测了scFv23对AD鼠模型脑中Aβ42沉积的影响。结果 通过对人源天然scFv噬菌体抗体库进行筛选得到一株与Aβ42具有高亲和力的克隆scFv23。实验发现scFv23可以特异性识别Aβ42寡聚体，纤维聚集体和鼠脑中Aβ42沉积，但是不能与Aβ42单体特异性结合。根据体外实验结果，scFv23可以有效抑制Aβ42寡聚体所诱导的细胞死亡，并且scFv23可以抑制Aβ42纤维聚集体的形成。体内实验结果发现，scFv23可以有效清除AD鼠模型中Aβ42沉积。结论 通过噬菌体文库筛选得到的scFv23能够特异性识别脑组织中的淀粉样沉积，并且有效抑制转基因鼠中淀粉样沉积的形成。体外实验表明scFv23可以有效抑制Aβ42寡聚体所诱导的细胞毒性。……