付跃 李连威 张阳阳

摘要[目的]优化25-羟基维生素D3[25（OH）VD3]的转化条件，提高25（OH）VD3产量。[方法]通过单因素试验和正交试验对菌株UV-FY-141转化生产25（OH）VD3的条件进行优化。[结果]确定其最佳发酵培养基：葡萄糖15.00 g，蛋白胨20.00 g，NaCl 5.00 g，CaCO3 2.00 g，FeSO4·7H2O 0.01 g，去离子水1 000 mL。优化后转化条件：发酵初始pH 6.5，发酵温度为28 ℃，发酵时摇床转速为200 r/min，发酵时间为72 h。在优化条件下，25（OH）VD3产量由原来的9.460 mg/L提高到13.130 mg/L，提高了38.79%。[结论]采用优化后的转化条件，可显著提高25（OH）VD3的产量。

关键词 25-羟基维生素D3；优化；发酵

中图分类号 R914.5 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2017）02-0007-04

Abstract[Objective] The aim was to optimize the conversion efficiency of 25（OH）VD3.[Method]We optimized fermentation conditions of strain UVFY141 by single factor and orthogonal experiment.[Result] The optimum fermentation conditions were determined as follows：glucose 15.00 g，peptone 20.00 g，NaCl 5.00 g，CaCO3 2.00 g，FeSO4·7H2O 0.01 g，and deionized water 1 000 mL.Conversion conditions were determined as follows：initial pH 6.5，fermentation temperature 28 ℃，rotation speed 200 r/min，fermentation time 72 h.The production of 25（OH）VD3 was improved by 38.79%，from 9.460 mg/L to 13.130 mg/L.[Conclusion] The optimized conditions can improve the yield of 25（OH）VD3 significantly.

Key words 25（OH）VD3；Opitimization；Fermentation

维生素D3（VD3）在人体内是没有活性的，只有转化成有活性的代谢产物才能发挥作用。维生素D3的活性衍生物主要有骨化二醇、骨化三醇等。维生素D3首先在肝脏转化成骨化二醇，然后在肾脏中转化成骨化三醇[1]，其中骨化二醇是血液中主要存在形式，骨化三醇是最有活性的代谢衍生物[2]。25-羟基维生素D3[25（OH）VD3]，又称骨化二醇，是通过人体内的VD3羟化酶转化而来的[3-4]，对光、空气、热敏感，不溶于水，易溶于乙醇等极性有机溶剂[5]。骨化二醇临床上用于治疗甲状腺功能衰退、骨质疏松、牛皮癣、慢性肾功能衰竭[1]。骨化二醇能够化学合成，但是步骤复杂，成本高，相对于化学合成，生物转化具有明显优势。研究表明，一些微生物能够将维生素D3转化成骨化二醇和骨化三醇，步骤简单，成本低[6]。生物转化速率不仅受微生物培养组分、培养过程的影响，而且受培养条件（pH、温度等）的影响[7] 。发酵条件的优化对生物转化生产VD3十分重要。笔者采用单因素试验和正交试验对生物法合成25（OH）VD3条件进行了优化，旨在为提高VD3的转化率提供理论依据。……