陈康勇 彭芳 薛竣仁 钟为铭 高志鹏

摘要 [目的]研究单增李斯特氏菌生物膜的形成特性。[方法]采用24孔板法培养生物膜，分别采用结晶紫染色法和光学显微镜进行生物膜的定量和定性研究，观察在不同培养时间（8、16、24、32、40、48 h）单增李斯特氏菌生物膜的形成状况。[结果]随着培养时间的增加，单增李斯特氏菌生物膜生物量逐渐增加，生物膜经历了黏附、微菌落形成、大菌落形成到成熟的全部过程。[结论]试验结果为单增李斯特氏菌生物膜相关研究提供了理论依据。

关键词 单核细胞增生李斯特氏菌；生物膜；形成特性

Biofilm Formation Characteristics of Listeria monocytogenes

CHEN Kang-yong1，PENG Fang1，XUE Jun-ren1，GAO Zhi-peng1，2* et al （1.College of Animal Science and Technology，Hunan Agricultural University，Changsha，Hunan 410128； 2.Collaborative Innovation Center for Efficient and Health Production of Fisheries in Hunan Province，Changde，Hunan 415000）

Abstract [Objective]The aim was to investigate the biofilm formation characteristics of Listeria monocytogenes. [Method]To investigate the characteristics of Listeria monocytogenes biofilm at different incubation times （8，16，24，32，40，48 h），24-well plate method was used to cultivate biofilm，and quantitative and qualitative data were obtained by crystal violet staining assay and light microscopy.[Result]With the increase of culture time，the biomass of Listeria monocytogenes biofilm increased gradually，and the biofilm went through the process of adhesion，microcolony formation，macrocolony formation to mature.[Conclusion]The results provide a theoretical basis for the related research of Listeria monocytogenes biofilm.

Key words Listeria monocytogenes；Biofilm；Formation characteristics

生物膜（BF）是细菌为了适应生存环境，黏附于非生物或者活性组织的表面，包被于自身分泌的胞外基质中，形成的一种三维聚合网状结构，细菌生物膜是一种和浮游生长对应的生长方式[1-3]。生物膜参与65%以上的感染，尤其是与医疗器械相关的、机体表面的（如皮肤、软组织等）和慢性感染，原因主要是生物膜对宿主防御和抗菌药物具有很强的抵御能力[4-6]。生物膜是细菌耐药性产生的重要原因，可使细菌的耐药性提高10～1 000倍[7-8]。生物膜感染已成為全球关注的问题。

单核细胞增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）是一种能在冷藏的温度下进行繁殖的致病菌，由于该细胞的苯酚-水浸出物能够诱导单核细胞生成，所以被命名为“单核增生细菌”[9]。人或者牲畜感染之后主要表现出败血症、胃肠炎、脑膜炎、孕妇流产等症状[10]。婴幼儿、老年人以及免耐受病人的临床死亡率约为30%[11]。……