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血清对细胞摄取DNA四面体纳米结构行为的影响

2017-07-12胡兴杰王则君殷敏李迪陈楠

分析化学 2017年7期
关键词:血清

胡兴杰++王则君++殷敏++李迪++陈楠

摘要 研究了细胞培养基中的胎牛血清(FB)对DNA四面体(etrahedral DNA nanostructure,DNs)进入eLa细胞的速度和内吞途径的影响。采用自组装技术得到荧光标记的DNs结构,利用PLC技术分离得到纯度>95%的DNs单体,分别采用流式细胞术和共聚焦显微成像等技术比较了在有无血清的情况下,细胞摄取量随时间的变化以及FB对DNs摄取途径的影响。实验结果表明,DNs在培养基和细胞裂解液环境中可以稳定存在12 h以上,培养基中的FB能够提高eLa细胞对四面体的摄取量, 但并未改变DNs进入eLa细胞的内吞途径。本研究揭示了环境中蛋白质等生物分子对于DNA四面体结构与细胞界面相互作用的影响,为基于DNA纳米材料的细胞学纳米载体的设计和优化提供了新思路。

关键词 DNA纳米结构; DNA四面体; 细胞摄取; 血清; 胞吞途径

1引 言

自组装 DNA纳米结构作为一种新的纳米材料,已被用于生物传感、纳米光子学等多个领域\[1\]。核酸分子独特的碱基互补配对的特性,赋予了DNA结构优异的可精确设计性和位点修饰的可寻址性,因此通过精确的设计和高效的制备方法,研究者已经制备出各种不同尺寸、形状和维度的 DNA 纳米结构\[2~5\]。此外,作为一种生物分子,DNA纳米结构自身具有良好的生物相容性和可降解能力,因而在生物医学领域有着巨大的应用前景\[6~12\]。DNA四面体(etrahedral DNA nanostructure, DNs)是一类合成方法简单、结构稳定的DNA三维纳米材料,通过4条DNA单链间的碱基互补配对作用能够直接形成金字塔型的纳米结构\[13\]。核酸(如单链、双链DNA等)本身表现为负电性,会与细胞膜产生静电斥力,通常需要借助于带正电荷的转染试剂才可以进入细胞。然……

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