□ 邓 瑜 广西壮族自治区百色食品药品检验所

HPLC检测中小学周围流动摊贩食品中苯并(a)芘的含量

□ 邓 瑜 广西壮族自治区百色食品药品检验所

本文从检测中小学周围流动摊贩煎炸食品中苯并(a)芘含量出发，探析中小学周围的食品存在的问题。最后得出，流动摊贩售卖的煎炸食品不合格。

中小学校；苯并(a)芘；HPLC；食品安全

苯并(a)芘又称3，4-苯并芘，简称BaP，由一个苯环和一个芘分子稠合而成的多环芳烃类化合物，分子式为C20H12

[1]。苯并(a)芘的结构图，如图1所示。食品中形成苯并(a)芘原因很多，多次使用高温动植物油、烧烤食品、煎炸过火的食品，都会产生苯并(a)芘，污染食品。

图1 苯并(a)芘的结构图

苯并(a)芘的存在对人体健康有巨大的威胁，有强致癌性，在人体内蓄积，具有长期隐匿的特性，并可诱发皮肤癌、肺癌、胃癌、膀胱癌及消化道癌等多种癌症[1]。

中小学周围的流动摊贩多，销售的食品价格低，购买便捷，但卫生状况差，原材料来源不明，食品安全卫生问题多，食用后容易引发群体性食源性疾患。

中小学生正处于长身体的特殊时期，生长发育不完全，脏腑娇嫩，同时缺乏食品安全知识，辨识能力差。中小学生频繁食用高致癌食品，会严重危害身体健康，并引发一系列的问题。

1 材料

1.1 仪器

LC-2030C 3D岛津高效液相色谱仪，带RF-20A荧光检测器，自动进样器，LabSolutions色谱工作站（岛津公司）；XS205Du电子分析天平（梅特勒-托利多）；PL2002N电子天平（梅特勒-托利多）；BUCH Syncore，Q-101平行蒸发仪（南京市贺而顿工业设备有限公司）；FA25高速组织粉碎机（FLUKO）；OA-SYSTM，N-EVAPTM112氮吹仪（美国 Organomation Associates公司）；SK820HP数控超声波清洗器等。

1.2 标准物质与化学试剂

标准物质：苯并(a)芘（ Benzo(a) pyrene）标准品购于Dr.Eherstorfer GmbH，含量99.6%，批号C20635000 10226，有效期至2019年11月。

化学试剂：环己烷、二甲基亚砜、甲醇、乙腈为色谱纯，Fisher公司；无水硫酸钠为分析纯；水为超纯水。

1.3 材料

样品：随机采集于百色城区内各中小学周围的流动摊贩，无菌采样袋封装每份样品。每个流动摊贩采集2种样品，每种2份，每份约100 g，2016年7月2日采集，采样情况见表1。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：CNW Althena PAHs HPLC C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为乙腈-水（85︰15）；流速为1.2 mL/min；检测波长：激发波长384 nm，发射波长406 nm；柱温为25 ℃；进样量为10 μL。

表1 流动摊贩售卖食品采样情况表

图2 苯并(a)芘标准物质与检测样品的HPLC图

2.2 苯并(a)芘溶标准液制备

准确称取苯并(a)芘标准品5.52 mg于25 mL容量瓶中，加甲醇制成浓度为219.92 μg/mL的标准储备溶液。准确量取标准储备溶液1.71 mL于25 mL容量瓶中，甲醇稀释成浓度为15.0 μg/mL的标准溶液A。准确量取标准溶液A 0.25 mL于25 mL容量瓶中，甲醇稀释成浓度为150.0 ng/mL的苯并(a)芘标准工作溶液。

2.3 试样制备

取适量代表性样品，绞碎均匀，置于4 ℃冰箱保存[2~3]。

2.4 测定步骤

2.4.1 提取

准确称取5.00 g于50 mL离心管中，加入5.0 g无水碳酸钠，15 mL环己烷，10 000 r/min匀浆2 min，超声提取5 min，4 000 r/min离心2 min，收集上清液于平行蒸发仪中，残渣用10 mL环己烷重复提取2次，合并环己烷提取液，浓缩到1 mL，转移浓缩液到至50 mL离心管中，用环己烷清洗平行蒸发仪的器皿，合并环己烷溶液，保持体积5 mL左右，分别加入5 mL二甲基亚砜萃取2次，每次涡旋混匀2 min，4000 r/min离心2 min，用吸管吸出二甲基亚砜，合并2次二甲基亚砜萃取液于50 mL离心管中，待进化处理。

2.4.2 净化

在二甲基亚砜萃取液中，加入15 mL 2.0 g/L硫酸钠溶液，分别加入5 mL环己烷反萃取3次，每次涡旋混匀2 min，4 000 r/min离心2 min，吸出环己烷，合并环己烷于20 mL刻度试管中，氮气吹近干，甲醇定容至1.0 mL，过0.45 μm滤膜，待检测分析。

2.5 线性关系考察

分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00 mL和5.00 mL标准工作溶液，甲醇定容至5 mL，标准系列中浓度分别为0、30、60、90、120 ng/mL和150 ng/mL，进样10 μL，记录色谱图，以苯并(a)芘浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线（如图2），得回归方程f(x)=782 383x+805 047，R2=0.999 3，苯并芘在0～150 ng/mL呈良好的线性关系。

2.6 精密度试验

精密吸取同一浓度的苯并(a)芘标准品溶液10 μL，注入液相色谱中，重复6次，并记录峰面积。结果RSD为0.163%，表明仪器精密度良好。

表2 样品中的测定结果表（µg/kg）

2.7 重复性试验

称取同一样品各6份，按“2.4”项下测定步骤制备。精密吸取10 μL注入液相色谱，记录峰面积，并计算含量。结果RSD为0.382%，表明本方法重复性良好。

2.8 加样回收率试验

称取已知含量的样品9份，按方法测定低限、最高残留限量、自选合适的浓度进行三水平加标回收实验，按“2.4”项下测定步骤制备。精密吸取10 μL注入液相色谱，记录峰面积，并计算回收率。结果平均回收率分别为91.3%、94.6%、96.7%，RSD分别为3.5%、1.5%、1.2%，表明本方法回收率良好。

2.9 样品测定

对所采集的20份样品进行苯并(a)芘测定，计算其中的含量，结果见表2。

3 讨论

本文按NY/T 1666的方法检验，并参考GB/T 27404附录F要求进行方法学验证。从检验结果可知，中小学周围流动摊贩销售的煎炸食品，苯并(a)芘均已超过GB2762给定≤5.0 μg/kg的限值[4]，属不合格食品，按《中华人民共和国食品安全法》第34条第2款规定，其必须禁止销售。

中小学周围流动摊贩数量多、分布面广、流动性大，食药监管部门每年都投入大量人力物力进行专项整治，但仍存在诸多无法忽略的问题。主要表现为以下几方面：①流动摊贩经营者健康状况不明确。《中华人民共和国食品安全法》第45条“从事接触直接入口食品生产经营人员每年应当进行健康检查，取得健康证明后方可上岗工作。”但目前，无健康证流动摊贩数量庞大；②流动摊贩经营环境的恶劣。流动摊贩营业场所不固定，各种食材，如生肉、熟肉存放在一起，加上室外空气中的灰尘烟尘污染、天热高温食物易变质腐烂以及蚊蝇等都是传播疾病，引发群体性食源性疾患的高危因素；③原材料来源无法追溯，安全无保障。流动摊贩经营者多为无业或低收入人群，他们法律意识缺失，为了快速、大量赚取利润，采用差、假、次甚至过期食品原料，进而导致食品原材料的来源难以追溯，难以查明，安全无保障。

本文从小部分流动摊贩售卖的煎炸食品中发现了含有大量的苯并(a)芘，为了中小学生的健康成长，各监管部门应积极合作，加强监管，务求实效，建立健全安全长效的监管机制，严把中小学周围食品的安全关。

[1]史巧巧.食品中苯并芘的研究进展[J].食品工业科技,2014(5):380-381.

[2]中华人民共和国农业部.NY/T 1666-2008 肉制品中苯并(a)芘的测定高效液相色谱法[S].北京:中国标准出版社,2008.

[3]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB/T 27404-2008 实验室质量控制规范 食品理化检测[S].北京:中国标准出版社,2008.

[4]中华人民共和国卫生部.GB 2762-2005食品中污染物限量[S].北京:中国标准出版社,2005.

邓瑜（1985-），男，广西桂林人，本科。研究方向：食品检验。