李 伟 卓召振 李荣辉 袁 军

(贵州省人民医院中心实验室，贵阳550002)

激活TLR5和NLRC4通路的重组鞭毛素蛋白对不同乳腺癌细胞系增殖的抑制作用①

李 伟 卓召振②③李荣辉③袁 军③

(贵州省人民医院中心实验室，贵阳550002)

目的：探究激活TLR5和NLRC4通路的重组鞭毛素蛋白对不同乳腺癌细胞系增殖的抑制作用。方法：表达和纯化重组鞭毛素蛋白即全长鞭毛素蛋白FliC(同时激活TLR5和NLRC4两条通路)、FliCΔ90-97(不能激活TLR5通路)、FliC-L3A(不能激活NLRC4通路)和FliCΔ90-97:L3A(两条通路都不激活)。用不同浓度的重组鞭毛素蛋白刺激MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞，72 h后，利用CCK8法检测其对肿瘤细胞增殖的影响，并计算抑制率。软琼脂形成实验：每孔细胞数为1 000个MCF-7细胞铺于6孔板中，重组鞭毛素蛋白浓度为1 μg/ml，培养14 d后，结晶紫染色，显微镜下计数克隆数，计算克隆形成率。结果：四种鞭毛素蛋白在0.1 μg/ml的浓度刺激下，对MCF-7细胞的抑制率达到30%,FliCΔ90-97对MCF-7的抑制作用是剂量依赖的。在1 μg/ml时单独激活TLR5的FliC-L3A鞭毛素蛋白的抑制率高于全长的FliC和单独激活NLRC4的FliCΔ90-97。FliCΔ90-97:L3A也对MCF-7细胞有抑制作用。四种鞭毛素蛋白对MDA-MB-231细胞在加转染试剂之后才表现出抑制效应。结论：鞭毛素蛋白可以抑制乳腺癌细胞MCF-7 和MDA-MB-231细胞的增殖，其机制可能是由于分别激活胞膜和胞内的除TLR5和 NLRC4以外的其他通路。

鞭毛素蛋白；TLR5；NLRC4；乳腺癌细胞

乳腺癌居女性恶性肿瘤第一位，已成为严重威胁女性健康和生命的杀手，对乳腺癌的治疗同其他肿瘤一样尚面临许多难题。越来越多的证据表明，TLRs在癌症进展中起着重要作用[1-4]。TLR4能够保护肿瘤细胞抵御免疫攻击，促进肿瘤生长[5]，而激活TLR3则能够促进乳腺癌和黑色素瘤的增殖[6]。……