吴小凡 马 斌 侯训尧 洪 艳 申 超 刘雪平

(山东大学附属省立医院老年神经科，济南250021)

柿叶提取物对HEK293-APPswe转基因细胞模型的抗氧化作用及对Nrf2/HO-1途径的影响①

吴小凡 马 斌②侯训尧 洪 艳 申 超 刘雪平

(山东大学附属省立医院老年神经科，济南250021)

目的：观察柿叶提取物(PLE)对阿尔茨海默病细胞模型HEK293-APPswe(20E2)的抗氧化应激的影响，并从核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶1(HO-1)信号通路研究其作用机制。方法：Western blot检测APP蛋白表达水平，ELISA检测各组细胞上清Aβ1-40的量，确定细胞模型是否建立成功。用CCK-8检测不同浓度的柿叶提取物对细胞活性的影响，选定干预最佳浓度。设分组：SH-SY5Y为空白对照组(NC组)，20E2为模型组(20E2组)，用柿叶提取物干预为加药组(20E2+PLE组)。DCFH-DA荧光探针检测各组细胞内ROS的变化，ELISA检测各组细胞上清Aβ1-42的量，Western blot检测胞核、胞浆Nrf2和全细胞HO-1蛋白的表达水平变化。结果：与模型组相比，加药组ROS表达减少，细胞外Aβ1-42浓度降低，细胞核内Nrf2表达增多， HO-1蛋白含量增加。结论：柿叶提取物能有效降低模型组氧化应激的水平，可能是通过降低Aβ1-42的聚集，激活Nrf2/HO-1信号途径，促进Nrf2合成和核转位，从而促进下游抗氧化蛋白HO-1的表达来减弱氧化应激的损伤。

柿叶；氧化应激；神经保护；Nrf2/HO-1

阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)是以进行性认知功能障碍和行为损害为主的中枢神经退行性疾病，其主要病理特征是β 淀粉样蛋白(β-amyloid，Aβ)沉积[1,2]。β淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein，APP)先后经α-分泌酶、β-分泌酶和γ-分泌酶降解，但是APP基因突变使得APP蛋白更易于被β-分泌酶、γ-分泌酶降解，从而产生更多的Aβ[3]。20E2细胞株是携带瑞典突变APP基因的HEK293细胞，相比正常神经细胞可产生更多的Aβ1-40和Aβ1-42，被用作AD的转基因细胞模型[4]。……