刘行仁 白义凤 梁 良 冯 静 邓 菲

(四川省医学科学院·四川省人民医院呼吸科，成都610072)

紫苏醇对肺癌A549细胞增殖和侵袭的抑制作用机制的研究①

刘行仁 白义凤②梁 良②冯 静③邓 菲④

(四川省医学科学院·四川省人民医院呼吸科，成都610072)

目的：探讨紫苏醇(Perillyl alcohol,PA)对肺癌A549细胞增殖和侵袭的抑制作用机制，并阐明其对肿瘤血管生成信号的影响。方法：不同浓度PA和厄洛替尼加入到A549细胞中，利用溴化3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑(MTT)法测定药物组对A549细胞的抑制作用，Transwell法检测PA对A549细胞侵袭的抑制作用，采用间接荧光标记法测定细胞内活性氧(ROS)水平的变化；分光光度法检测PA对细胞凋亡蛋白Caspase-3活性的影响，Western blot法检测A549中VEGF、HIF-1α及COX-2的表达，凝胶迁移或电泳迁移率实验测定A549细胞中NF-κB活性。结果：与空白对照组比较，随着浓度的增加(10、50、100 μg/ml)，PA和厄洛替尼对A549细胞生长的抑制率在不断地增加，差异均有统计学意义(P<0.05)，A549细胞侵袭能力呈现不断下降的趋势，差异均有统计学意义(P<0.05)，A549细胞内活性氧水平随厄洛替尼浓度的增加变化不大，而ROS水平随着PA的浓度的增加而增加，在100 μg/ml浓度的PA下引起的ROS百分率达到了(80.43±6.92)%，差异均有统计学意义(P<0.05)。细胞活力检测结果显示，随着PA和厄洛替尼浓度的增加和作用时间的延长，A549细胞中凋亡蛋白Caspase-3活性明显增加(P<0.05)，随着紫苏醇浓度的增加，COX-2、VEGF和HIF-1α的表达呈不断降低的趋势，EMSA检测结果显示，随着PA浓度的增加，NF-κB的条带面积不断减少。结论：PA可能参与并促进了ROS的生成和Caspase-3活性增加，最终诱导A549细胞的凋亡，PA可能通过降低NF-κB的表达，进而诱导COX-2、VEGF等的表达减少，使血管生成滞后，能够有效地使细胞的穿透能力下降和凋亡发生。

紫苏醇；肺癌A549细胞；增殖抑制作用；活性氧(ROS)水平；Caspase-3活性；血管生成信号通路

剂量、疗效和药物毒性等因素在肺癌常规的放化疗方案上已累积达到了极限，人们往往急需寻求低毒、高效性的作用机制上有别于现有化疗药物的物质，进而对肿瘤产生更强的杀伤力。肿瘤免疫治疗在奥地利召开的2015年“欧洲癌症大会上成为一个亮点，核因子NF-κB蛋白家族与多种基因的启动子和增强子序列位点特异性结合，调节基因的转录和表达，参与免疫、炎症、应激等反应，同时也参与调控细胞分化、增殖、凋亡等过程。NF-κB的激活途径主要有经典途径和旁路途径两条，这两条途径的激活最终都是通过磷酸化IκBα蛋白，并解除其对NF-κB的抑制来实现，因此NF-κB与慢性炎症及肿瘤的形成有着至关重要的关系。……